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ELISA样本处理及要求

发表时间:2011-02-22  |  点击率:1736

样本处理及要求 :
1. 血清 : 室温血液自然凝固 10-20 分钟 , 离心 20 分钟左右 ( 2000-3000 转 / 分 ) 。 仔细收集上
清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
2. 血浆:应根据标本的要求选择 EDTA 或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合 10-20 分钟后,离 心
20 分钟左右( 2000-3000 转 / 分 ) 。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次
离心。
3. 尿液:用无菌管收集,离心 20 分钟左右( 2000-3000 转 / 分 ) 。仔细收集上清,保存过程
中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。
4. 细胞培养上清 : 检测分泌性的成份时 , 用无菌管收集 。 离心 20 分钟左右 ( 2000-3000 转 /
分 ) 。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用 PBS ( PH7.2-7.4 )稀释细胞悬液,细胞浓度达到 100 万 /ml 左右 。 通过反复冻融 , 以使细胞破坏并放出细胞内成份 。 离心 20 分
钟左右( 2000-3000 转 / 分 ) 。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
5.组织标本 : 切割标本后 , 称取重量 。 加入一定量的 PBS , PH7.4 。 用液氮迅速冷冻保存备
用。标本融化后仍然保持 2-8 ℃ 的温度。加入一定量的 PBS ( PH7.4 ) ,用手工或匀浆器
将标本匀浆充分。离心 20 分钟左右( 2000-3000 转 / 分 ) 。仔细收集上清。分装后一份待
检测,其余冷冻备用。
6.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上
进行试验,可 将标本放于 -20 ℃ 保存,但 应 避免反复冻融 .
7.不能检测含 NaN3 的样品 ,因 NaN3 抑制辣根过氧化物酶的( HRP )活性。

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