脂肪酸合成酶(FAS)测试盒的测定步骤涉及多个环节
更新时间:2025-04-23 | 点击率:114
脂肪酸合成酶(FAS)测试盒的测定步骤涉及多个环节,包括样本准备、试剂准备、加样与反应、洗涤、显色与终止以及测定。在使用测试盒时,务必遵循使用说明和注意事项,以确保检测结果的准确性和可靠性。
脂肪酸合成酶(FAS)测试盒的测定步骤:
-血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激。收集血液后,3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
-血浆:建议使用EDTA、柠檬酸盐或肝素作为抗凝剂,3000转离心30分钟取上清。
-细胞上清液:3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
-组织样本:如肝脏等组织,需先进行匀浆处理,然后通过离心等步骤提取上清液作为待测样本。
-从冷藏环境中取出试剂盒,在开启之前需要室温平衡至少30分钟,确保所有试剂在使用前达到适宜温度。
-在相应孔中加入标准品或样品,然后依次加入酶标试剂等反应试剂。具体加样量和顺序应严格按照说明书要求进行。
-轻轻晃动混匀,注意避免产生气泡,以免影响反应结果。
-盖上封板膜,在适宜的温度下孵育一段时间,使抗原抗体充分结合。
-小心揭掉封板膜,弃去液体并甩干。
-每孔加满洗涤液,静置片刻后弃去,重复此过程多次,以充分洗净反应孔中的未结合物质。
-洗涤后,确保拍干板中的残余液体。
-加入底物TMB等显色剂,在适宜温度下避光孵育一段时间,使反应产生颜色变化。
-当观察到标准品孔出现明显颜色梯度时,加入终止液终止反应。
-使用酶标仪在规定波长下测定吸光度(OD值),通常为450nm波长。
-根据标准品的OD值绘制标准曲线,再根据样品的OD值计算其浓度或活性。

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