DNA电泳常见问题分析

  DNA电泳常见问题分析

常见问题 可能原因 建议解决方案

DNA降解避免核酸酶污染

电泳缓冲液陈旧

电泳缓冲液多次使用后，离子强度降低，pH值升高，缓冲能力减弱，从而影响电泳效果。

建议经常更换电泳缓冲液。

电泳条件不合适

电泳时电压一般不超过20V/cm，温度<30℃，大分子量DNA电泳时温度应<15℃，检查电泳

缓冲液是否有足够的缓冲能力。

DNA上样量过多减少凝胶中DNA的上样量

DNA含盐量过高电泳前通过乙醇沉淀除去过多的盐等杂质

DNA条带模糊

DNA有蛋白污染电泳前用酚/氯仿抽提除去蛋白等杂质

DNA变性电泳前勿加热并用20mM NaCl缓冲液稀释DNA

对于λ Hin dⅢ 片段

cos位点复性

电泳前于65℃加热DNA5分钟，然后在冰上冷却5分钟。

电泳条件不合适

电泳时电压一般不超过20V/cm，温度<30℃，大分子量DNA电泳时温度应<15℃，建议经常

更换电泳缓冲液。

DNA变性电泳前勿加热并用20mM NaCl缓冲液稀释DNA

DNA上样量不够增加凝胶中DNA的上样量

DNA降解避免核酸酶污染

DNA电泳常见问题分析

DNA跑出凝胶缩短电泳时间、降低电压、提高凝胶浓度

对于EB染色的凝胶所

用光源不合适

应用短波长（254nm）的紫外光源

小分子DNA跑出凝胶缩短电泳时间、降低电压、提高凝胶浓度

分子大小相近的DNA

带不易分辨

延长电泳时间并核准正确的凝胶浓度

DNA变性电泳前勿加热并用20mM NaCl缓冲液稀释DNA

条带很弱或

无DNA条带

DNA分子量太大常规

凝胶不合适

在脉冲凝胶电泳上分析

上海索莱宝