科普小课堂| 改良天狼星红:染色那些事儿,一篇讲明白!
改良天狼星红染色的反应原理是什么?
天狼星红是一种强酸性染料,能与胶原纤维中的碱性基团(如赖氨酸、羟脯氨酸)结合,在偏振光显微镜下呈现双折光现象,用于区分不同类型的胶原纤维(如Ⅰ型呈橙红色,Ⅲ型呈绿色)。

小鼠皮肤-偏振光结果
G1472-改良天狼星红染色试剂盒的试剂组成和各试剂作用?

改良天狼星红染色与其Masson三色染色的区别是什么?

改良天狼星红染色适用于什么样本?
本产品仅适用于组织样本的石蜡切片、冰冻切片染色,不适用于细胞样本(如培养细胞或细胞爬片等)染色。

改良天狼星红染色是否对固定液、包埋方式有特殊要求?
一般无特殊要求,固定液一般常用4%多聚甲醛或10%福尔马林;也可以使用Bouin’s、Zenker固定液,但含汞固定需充分脱汞。石蜡与冰冻切片均可;不推荐使用塑料包埋(甲基丙烯酸酯)会显著降低染料渗透。
染色的切片厚度一般建议多少?
石蜡切片建议3-5μm(一般采用3μm),心肌或瘢痕组织建议6μm;冰冻切片建议8-12μm(如果易脱片,可以降低厚度至7-8μm)。
改良天狼星红染色后背景偏红是为什么?如何改善这种情况?

改良天狼星红染色后,胶原纤维着色较浅或不明显,是什么原因?如何进行调整?

未进行Weigert铁苏木素染色,天狼星红染色后细胞核着红色是正常的吗?
这个为正常现象,G1472采用新型无毒的黄色染料替代K味酸,在能用于正常鉴别胶原纤维和肌纤维的同时,可能会额外引入部分细胞核浅着色(不影响结果判断),这个可以通过前面进行Weigert铁苏木素染色来避免。
铁苏木素染色是必须的吗?可以用常规苏木素替代吗?
如无细胞核染色需求,可不进行铁苏木素染色,直接进行天狼星红染色;不建议使用常规苏木素(如Mayer苏木素)替代,因为铁苏木素为抗酸型苏木素,能一定程度耐受天狼星红染色(酸性溶液),有效减少细胞核脱色。
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