实验室人的噩梦,您经历过几个?氨基酸衍生试剂盒的操作全流程解析来了!
实验室人的噩梦,你经历过几个?
还记得那些年,我们为了测个氨基酸,不仅要忍受衍生试剂现配现用的焦躁,还要在精确的秒表倒计时里上演“手速大比拼"?
试剂降解了?重来!
峰形怪异?重来!
对于每一个在液相色谱前“求神拜佛"的检测人来说,氨基酸衍生简直就是一场对耐心、手速和运气的考验。
但在这个高速发展的新时代,索莱宝标准品要给这场“噩梦"画上句号!作为你们实验的“后勤保障部",今天就带大家深扒一下,如何使用索莱宝新出的这款货号:SDK1010 氨基酸衍生化试剂盒(OPA法),把这场让人抓狂的实验,变成一套行云流水的“傻瓜式"操作。
为什么大家都爱“OPA法"?
在《中国药典》收录的众多衍生方法中,OPA(邻苯二甲醛)法之所以能脱颖而出,成为实验室的“流量担当",是因为它有两个绝杀技:
√ 速度极快:OPA与氨基酸在室温下仅需数分钟甚至数十秒即可完成反应。
√ 灵敏度高:衍生产物具有强紫外吸收(338 nm)或荧光特性,特别适合痕量分析。
那就废话不多说,开始展示。

首先确认试剂盒看包装有无破损、是否完好,然后打开试剂盒按照说明书严格操作。

01 实验前准备工作
Pre-experimental preparations
1.配置流动相A

2. 配置流动相B

3. 将配置好的流动相A和B抽滤后转移置流动相瓶中,超声脱气

注:配置好的流动相最好不要隔天(现用现配)。
4. 标准溶液的配制(标准品需用户自备):按照说明书自行配置即可
5. 衍生试剂的配置(25T):可直接放入我们送的棕色无标签空瓶中

注:避光待用即为衍生试剂(现用现配)。
02测定步骤
Determination steps
1. 打开电脑盒仪器各模块按照说明书上的“二、测定步骤的1和2"进行设定仪器
2. 衍生步骤
自动衍生(展示的是安捷伦HPLC仪器的操作):

手动衍生

注:衍生后的产物不稳定,易发生降解,需要及时检测
3. 实验需要同时做空白对照:即用等量0.1M HCl(溶解标准品的溶剂)重复2中衍生步骤后进液相检测,以排除空白干扰。
03 结果展示
Results presentation


温馨提示
1. 衍生试剂盒不是提取试剂盒,其主要是为了让氨基酸能够被仪器检测到,对提取出来的氨基酸进行的一系列操作~
2. 做实验前需知:高效液相色谱仪(配备荧光(FLD)检测器)、配备C18色谱柱(4.6×250 mm,耐水性≥90%)、抽滤装置、可调式移液枪、注射器、0.22 μm有机系滤膜、色谱级甲醇、乙醇、乙腈等。
3. 该盒子不提供标准品,需要的标准品需自行购买; 如需订制产品,请与我们联系。
4. 由于液相仪器和色谱柱型号的不同,可以根据实际情况调整仪器设置条件。
5.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
6. 该试剂仅用于科研领域,不适用于临床诊断或其他用途。
从“手动挡"的狼狈,到“自动挡"的从容,你差的只是一个好用的衍生化试剂盒。如果还有关于标准品选择或使用流程的疑问,记得随时滴滴你的标准品部门搭档!
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注:除此之外您想了解更多信息,联系我哦~
