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瑞氏染液的染色原理及使用注意事项

更新时间:2026-06-28  |  点击率:19
瑞氏染液的染色原理是利用细胞不同组分的酸碱性差异实现选择性着色:

细胞核、核酸等酸性物质,与碱性染料亚甲蓝/天青B结合,染成蓝紫色

血红蛋白、嗜酸性颗粒等碱性物质,与酸性染料伊红结合,染成粉红色

中性颗粒可同时吸附两种染料,呈现紫红色

染色时需搭配pH 6.4~6.8的缓冲液,保障染色效果稳定,避免出现过蓝、过红的染色异常

常见染色异常原因:

染色偏红(过酸):缓冲液 pH 过低、冲洗时间过长、染液放置太久氧化失效。

染色偏蓝(过碱):缓冲液偏碱、涂片太厚、染色时间过长、玻片未清洁带碱性杂质。

涂片有黑色染料颗粒沉淀:先倒染液再冲水、染液浑浊污染、甲醇含水量过高。

细胞成片脱落:涂片未干透、甲醇固定时间太短、冲洗水流冲击力过大。

瑞氏染液的使用注意事项:

染液保存:久置需密封,防止甲醇挥发或氧化成甲酸;储存期一般6~12个月

pH控制:染色环境pH必须维持在6.4~6.8,超出此范围会导致染色偏差

染色时间:与染液浓度、室温、细胞密度有关,需根据经验摸索调整

冲洗技巧:不可先倒掉染液再冲洗,否则染料会沉着在血膜上;冲洗时间不宜过长,防止脱色

复染与脱色:染色过淡可复染;染色过深可用甲醇脱色

血膜干燥:未干透的血膜不能立即染色,否则细胞易脱落