除去血液中的纤维蛋白或肝素处理血液以1:1的比例用生理盐水或平衡盐溶液稀释,在分离溶液中分层,低速离心30分钟。通过离心,迁移能力不同终形成不同的细胞层。
大部分的红细胞和粒细胞通过梯度迁移形成颗粒状。由于其密度不同,淋巴细胞和其他单个核细胞(单核细胞和血小板)分布在在血浆和LSM两层中间。淋巴细胞可以通过回抽分层回收,在进一步去除血小板,LSM和血浆。
以下的操作步骤是初由Böyum.设计的程序的众多改良版本中的一种。此程序的改良是通过运用除去血液中的纤维蛋白或抗凝血剂处理人体血液;这种改良对于其他物种来源血液或者其他组织非常有必要。
2. 无菌转移3 mlLSM到15 ml离心管中。
3. 混合2 ml除纤维蛋白血液或肝素处理血液 和2 ml 生理盐水
4. 仔细的将稀释血液加入3 mlLSM(室温)于15ml离心管中,在血液和LSM中形成一个明显的分层。不要将稀释血液混合入LSM中。
5. 室温下400g离心15-30分钟,离心可以沉淀红细胞和多核白细胞同时可以再LSM上形成一层单核淋巴细胞,如上图所示。
6. 吸出淋巴细胞上方2-3mm的血浆。
7. 吸取淋巴细胞层以及它下面一半的LSM和转移到另外的一个离心管。加入等体积的平衡盐缓冲液至淋巴细胞离心管中,室温离心10分钟,离心速度设定在既不损伤细胞又能沉淀细胞即刻,例如160 - 260 x g(去除LSM和降低血小板的百分比)。
8. 用平衡盐缓冲液清洗细胞,用适当的培养基重悬细胞。
代理公司:上海索宝生物科技有限公司
54261506
MP Biomedicals
简介
MP Biomedicals 是一家性的生物医药公司,总部位于美国加利福尼亚州南部。成立于195 , 其前身是ICN Biomedicals ,2003 年7 月正式改名为 MP Biomedicals 。 公司的服务宗旨是为科学家和研究员提供高创新高质量的研究工具及的服务,协助追求科研上的开拓性进展,并将改变生命的设想实现希望到现实的转变!
公司目前生产和销售的产品超过55,000 多种 ,是世界上能够提供生命科学、精细化学及临床诊断产品的少数几家公司之一。范围内分布有通过ISO 认证和FDA 注册的生产商,并配有完善的物流中心。公司在欧洲、亚洲、澳大利亚和美国建立了一个由经销商、通讯设施、办事处组成三位一体的巨大网络,无论何时何地都能为客户提供高质量的产品。
不管生命科学和生物技术市场的发展活力如何,我们承诺一直支持客户努力追求科研的新发现。从基础研究、扩大规模研究到全面生产和临床诊断测试,公司服务于各个行业,不仅提供专业领域的服务,而且供应大规模的精细化学品。
顾客愿意选择与MP 合作,正因为它是生命科学研究和诊断产品开发领域能够提供长期合作和值得信赖的公司。它也会停止,坚持走在不断变化的生物医药行业的前端。
主要产品
公司的生命科学类产品主要应用于细胞生物学、分子生物学、蛋白质组学、药物开发、样品预处理体系及固相肽合成几个方面,其产品包括:
序号
产品类型
详细种类(或相应用途)
1
吸附剂
氧化铝,二氧化硅, 液相色谱/ 中低压色谱吸附剂、干柱薄层层析用、离子交换树脂等
2
抗体及免疫试剂
一抗、二抗、检测试剂、纯化蛋白
3
细胞凋亡
抗体、检测试剂盒、抑制剂、底物、蛋白、酶、多肽
4
生化试剂
酸碱、氨基酸、抗生素、生物缓冲液、生物大分子、碳水化合物、检测用试剂、电泳或杂交用、香料或香精、脂质、核苷或核苷酸、盐类、血清、溶剂、表面活性剂
5
培养基及试剂
细菌/ 酵母培养基、哺乳动物/ 植物/ 昆虫细胞培养基
6
试剂盒
细胞凋亡、细胞生物学、核酸纯化、植物培养基、转化、转染、载体的基因表达、
7
实验室清洁剂及消毒剂
7X 清洁剂、MPX 消剂
8
实验器具及仪器
生化产品、放射化学产品、脂肪和油分析试剂、试剂盒及相关、微量滴定、移液枪及枪头、组织培养用品
9
放射化学试剂
氨基酸、碳水化合物、CAT 实验试剂、环核苷酸、碘化合物、脂质及羧酸、核苷酸、前体及其他化合物、放射性核素、受体及其他、闪光试剂及相关
10
稀土及精细化学品
胺类、羰基化合物、羧酸及衍生物、卤素化合物、杂环化合物、烃类、羟基及衍生物、无机化合物、有机氮化合物、有机磷、有机硫、有机金属及稀土类
公司的诊断类产品主要应用于新生儿、阿尔茨海默病、自身免疫性、生物胺、心脏病疾病、内分泌、新生儿、食品质量及生物柴油、 HbsAg / HbsAb 试剂、传染病、病毒学、肿瘤等方面的检测工作。
旗下重要品牌
ICN 生物医学化学药品公司从 1960 年成立以来,随着其生物医学科研产品的开发和扩展,现在已经成为整个世界上生物技术科研产品和医学临床诊断产品的身居主导地位的供应者。 ICN 现在供应数千种化学药品、化学试剂、实验设备和诊断器械,能够满足整个生物技术领域的全部需求。
2004 年 9 月 Mp biomedicals 成功收购 Qbiogene 公司,该公司是由 3 家公司联合成立的生物试剂公司,经济势力强,技术力量雄厚,产品质量非常可靠且产品线非常广,包括: DNA/RNA 分离和纯化试剂盒、核酸抽提仪器、腺病毒载体、 FISH 探针、 PCR 相关试剂、即用型培养基、基因表达和分析研究试剂盒、转染试剂、限制性内切酶、电泳和杂交试剂等。另外拥有众多品牌,如 BIO 101 , ONCOR , MERLIN 等。
2010 年 6 月 Mp biomedicals 正式收购新西兰 ICPbio International LTD ,该公司是一家致力于蛋白生物制剂研发和生产的公司。该公司利用高水平的层析技术,提供出高纯度、高完整性的蛋白质,且在蛋白处理过程中异于传统沉淀法维持蛋白的活性。不仅如此,其工艺质量体系确保了高水平的质量控制技术及质量统一性,能够满足生物医药市场对蛋白质量的高要求。公司的产品包括凝血酶、铁蛋白、白蛋白及抗体。
LSM 淋巴细胞分离液
LYMPHOCYTE SEPARATION MEDIUM 用途:
用于体外分离外周淋巴血细胞,也可以从其他来源中分离单核细胞,包括脐带血细胞和骨髓细胞。 方法概述:
分离混合血液白细胞早期的方法,总是伴随红细胞聚集,只轻微影响白细胞。通过离心,红细胞密度增加聚集,同时可以从离心管上部收集白细胞。
Böyum提出了一种更方便,通过使用Ficoll® 甲泛影钠溶液离心快速分离方法。稀释的血液在Ficoll?甲泛影钠溶液中分层,低速短时离心。红细胞和沉降到管底的粒细胞,和单个核细胞(淋巴细胞)和血小板可以从两个分层之间收集。
许多研究者不断努力,修订了Böyum方法,MP生物医学公司生产的LSM,方法的独特之处是运用,泛影钠成功的代替了甲泛影钠。
程序原理:
除去血液中的纤维蛋白或肝素处理血液以1:1的比例用生理盐水或平衡盐溶液稀释,在分离溶液中分层,低速离心30分钟。通过离心,迁移能力不同终形成不同的细胞层。
大部分的红细胞和粒细胞通过梯度迁移形成颗粒状。由于其密度不同,淋巴细胞和其他单个核细胞(单核细胞和血小板)分布在在血浆和LSM两层中间。淋巴细胞可以通过回抽分层回收,在进一步去除血小板,LSM和血浆。
试剂:
LSM® is a sterile filtered solution which contains 6.2g Ficoll and 9.4 g sodium diatrizoate per 100 ml. The density is 1.0770-1.0800 g/ml at 200C.
LSM® 是一种灭菌过滤溶液,每100毫升包含6.2克聚蔗糖和9.4克钠胺。密度是1.0770-1.0800克/毫升20℃。
使用说明:
以下的操作步骤是初由Böyum.设计的程序的众多改良版本中的一种。此程序的改良是通过运用除去血液中的纤维蛋白或抗凝血剂处理人体血液;这种改良对于其他物种来源血液或者其他组织非常有必要。
1. 轻轻颠倒瓶子使LSM充分混合
2. 无菌转移3 mlLSM到15 ml离心管中。
3. 混合2 ml除纤维蛋白血液或肝素处理血液 和2 ml 生理盐水
4. 仔细的将稀释血液加入3 mlLSM(室温)于15ml离心管中,在血液和LSM中形成一个明显的分层。不要将稀释血液混合入LSM中。
5. 室温下400g离心15-30分钟,离心可以沉淀红细胞和多核白细胞同时可以再LSM上形成一层单核淋巴细胞,如上图所示。
6. 吸出淋巴细胞上方2-3mm的血浆。
7. 吸取淋巴细胞层以及它下面一半的LSM和转移到另外的一个离心管。加入等体积的平衡盐缓冲液至淋巴细胞离心管中,室温离心10分钟,离心速度设定在既不损伤细胞又能沉淀细胞即刻,例如160 - 260 x g(去除LSM和降低血小板的百分比)。
8. 用平衡盐缓冲液清洗细胞,用适当的培养基重悬细胞。
订购信息: 相当于sigma 公司的 Histopaque® -1077 产品
厂家说明
MP Biomedicals 生物医学公司是位于美国加利福尼亚州的生命科学和生物技术厂商。2004 年底成功收购Qbiogene 、ICN ,现在有5 个大型仓库,能够及时供应各行业需求,亚洲仓库位于新加坡。它致力于生命科学领域的基础研究和探索。目前它提供55000 多种产品,是世界上能全面提供生命科学产品和临床诊断产品的几家厂商之一。