胰蛋白酶-琼脂糖凝胶 4B 说明书
更新时间:2010-04-21 | 点击率:3090
胰蛋白酶-琼脂糖凝胶 4B
一、 简介
本公司生产的胰蛋白酶-琼脂糖凝胶4B是把高纯度的胰蛋白酶固定到活化好的琼脂糖凝胶上,它可以用于酶切,同时也可以可以纯化一些能和它结合的物质,如丝氨酸蛋白酶抑制剂等。
二、 亲和填料特性:
特点 | 基团脱落少,结合特异性强 |
配基 | 胰蛋白酶 |
配基密度 | ≤10mg/ml |
亲和填料的颗粒大小 | 45-165μm |
大流速 | 300cm/h |
pH范围 | 1.5-10,在位清洗时pH范围可到1.5-10 |
使用温度 | 4℃~常温 |
保存温度 | +4~8℃ |
保存液体 | 20%乙醇 |
三、 适用范围:
胰蛋白酶-琼脂糖凝胶4B用于纯化各种于之结合的物质,如酶抑制剂等。
四、 亲和填料应用的注意事项:
1、凝胶从冷室或冰箱中取出后好在室温下缓慢振摇恢复到室温,然后再装柱,以免产生气泡影响柱效。
2、吸附:20-50mM,pH7.4-8.0含0.2-0.5M NaCL的缓冲液,常用的为Tris-HCl缓冲液。
3、洗脱:可以用浓度为0.2-2M 的pH1.5-5左右的酸性缓冲液进行阶段或者线性洗脱。
4、上样样品必须与平衡柱子的缓冲液的pH、电导相同。
5、不同的样品,吸附和洗脱方法不相同,可以根据相关的文献进行。
6、胰蛋白酶-琼脂糖凝胶4B亲和填料的再生处理方法:先用0.1M Tris-HClpH7.0缓冲液洗3个柱床体积,然后用0.1M NaOH含2MNaCl流洗3个床体积,后用3M NaCL洗 3个床体积即可。如果再生的效果还不好,也可以用0.2-0.5M pH1.5的缓冲液冲洗3-5个柱床体积,然后再用水清洗,保存在20%乙醇中即可。长期不用好加抑菌剂如0.2%叠氮钠,酸洗柱子的时间不能太长,否则会缩短填料的寿命。
7、该亲和填料保存条件为20%乙醇,+4~8℃。
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