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透析袋简介及处理

发表时间:2014-04-16  |  点击率:2928

透析袋简介:

    透析技术自Thomas Graham 于1861年发明到现在已有一百多年的历史,它已成为生物化学实验室简便,常用的分离纯化技术之一。在生物大分子的制备过程中,去除盐、少量有机溶剂、小分子杂质、样品浓缩和改变微量样品的缓冲系统等都要用到透析技术。

    生物样品的透析只需使用的半透膜即可完成。通常是将半透膜制成袋状,将生物大分子样品溶液置入袋内,浸入水或缓冲液中,样品溶液中的大分子量的生物大分子被截留在袋内,而盐和小分子等物质不断扩散透析到袋外,直到袋内、外两边的浓度达到平衡。保留在透析袋内未透析出的样品溶液称为“保留液”,袋(膜)外的溶液称为“渗出液”或“透析液”。透析的动力是扩散压,扩散压是由横跨膜两边的溶质浓度梯度形成的。透析的速度同欲透析的小分子溶质在膜内外两边的浓度梯度、膜的面积和温度成正比,与膜的厚度成反比。升高温度可加快透析速度。为大限度地保持生物大分子的活性,通常采用4℃透析。 透析膜可用动物膜和玻璃纸等,但用的多的还是用纤维素制成的透析膜。目前较常用的是美国Union Carbide (联合碳化物公司)和美国光谱医学公司生产的各种尺寸的透析管,其截留分子量MwCO(即留在透析袋内的生物大分子的小分子量,缩写为MwCO)通常从700到数万不等。 

    商品化的透析袋可制成管状,其扁平宽度为6~50 mm不等。为防干裂,出厂前一般都经10%的甘油处理,透析袋中含有微量的硫化物、重金属和一些具有紫外吸收的杂质,它们对蛋白质和其它生物活性物质有害,用前必须除去。新购进的透析袋必须经过处理才能使用。50%的乙醇煮沸1小时,再依次用50%乙醇、0.01 mol/L碳酸氢钠和0.001 mol/L EDTA溶液洗涤,再用蒸馏水冲洗后即可使用。实验证明,50%乙醇处理对除去具有紫外吸收的杂质特别有效。使用后的透析袋洗净后可存于蒸馏水中,置4℃保存。若长时间不用,可加入适量的叠氮钠(NaN2),以抑制微生物的生长。干的透析袋弯折时易出现裂口,用时必须仔细检查。 

    经过处理的透析袋,使用时,一端用橡皮筋或线绳扎紧,也可以使用特制的透析袋夹夹紧,由另一端灌满蒸馏水,用手指稍加压,检查是否漏液,确证无误后,再用蒸馏水洗净,方可装入待透析样品。装入样品时通常要留三分之一至一半的空间,以防透析过程中,因透析样品中的小分子浓度较大,袋外的水和缓冲液过量进入袋内将袋涨破。含盐量很高的蛋白质溶液透析过液时,体积增加是正常的,有时甚至可达50%以上。透析可以使用烧杯、量筒和塑料桶等容器,容器的大小以20-50:1为宜。少量样品溶液的透析,可在袋内放一截两头烧园的玻璃棒或两端封口的玻璃管,以使透析袋沉入液面以下。 

    通常为了把握透析效果,有时需要对透析液中欲去除的小分子残留物进行分析,如甘氨酸、二甲基甲酰胺、甲醛、戊二醛、碳酸根、偶联剂等。小分子残留物的检测分析方法很多,如 (NH4)2SO4可用1%的BaCl2检查,NaCl、KCl等可用1%的AgNO3 检查。有些检测方法比较复杂,或需要一定的条件,如确有必要可参考相关文献资料。

    为了加快透析速度,提高透析效率,除及时更换透析液外,还可使用磁力搅拌,还可以使用各种透析装置。使用者也可以自行设计与制作各种简易的透析装置。美国生物医学公司(Biomed Instruments Inc.)生产的各种型号的Zeineh 透析器,由于使用对流透析的原理,使透析速度和效率大大提高。 

附:透析袋的处理
 1. 根据需要,把透析管剪截成适当长度(10—20cm)。
 2. 在大体积的2%(w/v)碳酸氢纳和1mmol/L EDTA(pH8.0)中将透析管煮沸10分钟。
 3. 用蒸馏水彻底清洗。
 4. 于EDTA(1mmol/L,pH8.0)中煮沸10分钟, 
 5. 或将透析管置盛有蒸馏水的烧杯内,高压蒸汽灭菌10分钟。
 6. 冷却后,存放于4℃。透析管必须确保始终浸于溶液中。
 7. 从此时起取用透析管时总须戴手套。
 8. 用前将透析管用蒸馏水清洗干净后即可使用。

 

普通透析袋附录:

货号名称产地规格单位
MD10-14透析袋MD10(8000-14000)D美国 Viskase5米/卷
MD25-14透析袋MD25(8000-14000)D美国 Viskase5米/卷
MD34-14透析袋MD34(8000-14000)D美国 Viskase5米/卷
MD44-14透析袋MD44(8000-14000)D美国 Viskase5米/卷
MD77-14透析袋MD77(8000-14000)D美国 Viskase5米/卷
MD34-7透析袋MD34 ( 7000 D )美国 Viskase5米/卷
MD34-3.5透析袋MD34 ( 3500 D )美国 Viskase5米/卷
MD44-3.5透析袋MD44 ( 3500 D )美国 Viskase5米/卷
TXDJZ-60透析袋夹子美国进口60mm
TXDJZ-40透析袋夹子美国进口40mm
TXDJZ-80透析袋夹子美国进口80mm

 

即用型透析袋附录:

货号名称中文MWCO规格
131060Spectra/Por CE dialysis tubing,100-500 MWCO透析袋MD31(100)100-500D(道尔顿)0.5m
131096Spectra/Por CE dialysis tubing, 500-1000 MWCO透析袋MD31(500)500-1000D(道尔顿)0.5m
131204Spectra/Por CE dialysis tubing, 3500-5000 MWCO透析袋MD31(3500)3500-5000D(道尔顿)0.5m
131420Spectra/Por CE dialysis tubing, 100000 MWCO透析袋MD31(100000)100kD(10万道尔顿)0.5m
131450Spectra/Por CE dialysis tubing, 300000 MWCO透析袋MD16(300000)300kD(30万道尔顿)0.5m
131486Spectra/Por CE dialysis tubing, 1000000 MWCO透析袋MD16(1000000)1000kD(100万道尔顿)0.5m
132636Spectra/Por 6 dialysis tubing, 1K MWCO透析袋MD18(1000)1KD(一千道尔顿)0.5m
132638Spectra/Por 6 dialysis tubing, 1K MWCO透析袋MD38(1000)1KD(一千道尔顿)0.5m
132640Spectra/Por 6 dialysis tubing, 1K MWCO透析袋MD45(1000)1KD(一千道尔顿)0.5m
132620Spectra/Por 6 dialysis tubing, 2K MWCO透析袋MD18(2000)2KD(二千道尔顿)0.5m
132625Spectra/Por 6 dialysis tubing, 2K MWCO透析袋MD38(2000)2KD(二千道尔顿)0.5m
132633Spectra/Por 6 dialysis tubing, 2K MWCO透析袋MD45(2000)2KD(二千道尔顿)0.5m
132590Spectra/Por 6 dialysis tubing, 3.5K MWCO透析袋MD18(3500)3.5KD(三千五道尔顿)0.5m
132592Spectra/Por 6 dialysis tubing, 3.5K MWCO透析袋MD45(3500)3.5KD(三千五道尔顿)0.5m
128058Spectra/Por 6 dialysis tubing, 8K MWCO,透析袋MD18(8000)8KD(八千道尔顿)0.5m
132582Spectra/Por 6 dialysis tubing, 8K MWCO,透析袋MD32(8000)8KD(八千道尔顿)0.5m
132586Spectra/Por 6 dialysis tubing, 8K MWCO,透析袋MD50(8000)8KD(八千道尔顿)0.5m
128118Spectra/Por 6 dialysis tubing, 10K MWCO透析袋MD18(10000)10KD(一万道尔顿)0.5m
132574Spectra/Por 6 dialysis tubing, 10K MWCO透析袋MD32(10000)10KD(一万道尔顿)0.5m
132576Spectra/Por 6 dialysis tubing, 10K MWCO透析袋MD45(10000)10KD(一万道尔顿)0.5m
128158Spectra/Por 6 dialysis tubing, 15K MWCO透析袋MD18(15000)15KD(一万五千道尔顿)0.5m
132564Spectra/Por 6 dialysis tubing, 15K MWCO透析袋MD32(15000)15KD(一万五千道尔顿)0.5m
132566Spectra/Por 6 dialysis tubing, 15K MWCO透析袋MD45(15000)15KD(一万五千道尔顿)0.5m
128218Spectra/Por 6 dialysis tubing, 25K MWCO透析袋MD18(25000)25KD(二万五千道尔顿)0.5m
132554Spectra/Por 6 dialysis tubing, 25K MWCO透析袋MD34(25000)25KD(二万五千道尔顿)0.5m
132544Spectra/Por 6 dialysis tubing, 50K MWCO透析袋MD34(50000)50KD(五万道尔顿)0.5m
132680Spectra/Por 2 dialysis tubing, 12-14K MWCO透析袋MD45(12000-14000)12-14KD(1.2万到1.4万道尔顿)0.5m
1-0550-18H1 High Grade Membrane透析袋md18(5000)5kd0.5m
1-0550-30H1 High Grade Membrane透析袋md30(5000)5kd0.5m
1-0550-40H1 High Grade Membrane透析袋md40(5000)5kd0.5m

 

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