电话咨询:
021-54100800
技术文章
当前位置:首页 > 技术文章 > 瑞氏染液的作用与应用

瑞氏染液的作用与应用

发表时间:2015-12-29  |  点击率:1219

瑞氏染液的作用与应用

瑞氏染液由酸性染料伊红和碱性染料美蓝组成的复合染料,溶于甲醇,后解离为带正电的美蓝和带负电的伊红离子。伊红通常为钠盐,有色部分为阴离子。美蓝通常为氯盐,有色部分为阳离子。甲醇的作用:一是溶解美蓝和伊红,使其解离为有色美蓝正离子的和伊红负离子。后两者可以选择性地吸附于血细胞内的不同成分而使其着色;二是固定细胞形态,加速染色反应,增强染色效果。

瑞氏染液染色原理:

瑞氏染色法使细胞着色既有化学亲和反应,又有物理吸附作用。瑞氏染料由酸性染料伊红和碱性染料美蓝的氧化物(天青)组成,其深于甲醇后,解离为带正电的美蓝和带负电的伊红离子。各种细胞由于所含化学成分不同,对染料的亲和力也不一样,因此,染色后各种细胞呈现出各自的染色特点。

瑞氏染液配置方法:

瑞士染料830gm或1g;

甲醇(AR) 500ml或600ml;

先称干燥(事先放入温箱干燥过一夜)瑞氏染料放置乳钵内,用乳棒轻轻敲碎染料成粉末,再行研磨至听不到研芝麻声即呈细粉末,加少许甘油或甲醇溶解研磨,使染料在乳缸内显“一面镜”光泽,而无染料粉粒沉着。再加较多量甲醇研磨呈一面镜光亮,静置片刻,将上层液体倒入一清洁储存瓶内(好用甲醇空瓶),再加甲醇研磨,重复数次,至乳钵内染料及甲醇用完为止,摇匀,密封瓶口。存室温暗处,储存愈久,则染料溶解、分解就越好,一般储存3个月以上为佳。

瑞氏染液使用说明:

1、取涂片、自然干燥。

2、滴加瑞氏染液染3分钟,使标本被其中甲醇所固定。

3、加等量PH6.4的磷酸盐缓冲液(或等量超纯水)轻轻晃动玻片, 与瑞氏染色液混匀,静置5分钟。

4、水洗、吸干、镜检。

5、细菌染成蓝色,组织细胞胞浆红色,细胞核蓝色。

注意事项:

1、PH对细胞染色有影响。由于细胞中各种蛋白均为两性电解质,所带电荷随溶液PH而定。对某一蛋白质而言,如环境PH<PI(蛋白质的等电点),则该蛋白质带正电荷,即在酸性环境中正电荷增多,易与酸性伊红结合,染色偏红;相反,则易与美蓝天青结合,染色偏蓝。为此,应使用清洁中性的玻璃片,稀释液必须用PH6.4~6.8的确良缓冲液。冲洗玻片必须用流水。

2、未干透的血膜不能染色,否则染色时血膜易脱落。

3、染色时间与染液浓度、染色温度成反比;而与细胞数量成正比。

4、冲洗时不能先倒掉染液,应用流水冲去,以防染料沉淀在血膜上。

5、如血膜上有染料颗粒沉积,可加少许甲醇溶解,但需立即用水冲洗掉甲醇,以免脱色。

6、染色过淡,可以复染。复染时应先加缓冲液,创造良好的染色环境,而后加染液,或加染液与缓冲液的混合液,不可先加染液。

7、染色过深可用水冲洗或浸泡水中一定时间,也可用甲醇脱色。

8、染色偏酸或偏碱时,均应更换缓冲液再重染。

瑞氏染液为索莱宝常备货产品,货号为G1040。瑞氏染料是由碱性染料美蓝(Methvlem blue)和酸性染料伊红(Eostm Y)组成的复合染料,溶于甲醇 。在正常情况下,血膜外观染成淡紫红色。显微镜下,红细胞呈粉红色,在厚薄均匀处,略有碟状感。白细胞浆中颗粒清楚,并显示出各种细胞特有的色彩。细胞核染紫红色,核染色质结构清楚。

联系我们

contact us

咨询电话

15021977219

扫一扫 微信咨询




扫一扫访问手机站扫一扫访问手机站
访问手机站