3-AT 是酵母 HIS3 蛋白(组氨酸)的竞争性抑制剂,可抑制组氨酸的合成。HIS3 是酵母单杂,双杂,三杂实验的报告基因。HIS3 报告基因在酵母中会有微弱的泄露表达,即报告基因没有被激活时的本底表达。此外,某些蛋白或 DNA 片段在酵母中有自激活现象,在没有互作发生时也可以激活报告基因,这种自激活现象导致酵母互作实验产生很多假阳性。这时需要在培养基中加入适量的 3-AT 以抑制 HIS3 的本底表达或抑制自激活,使得背景降低,或者增加使用报告基因如 ADE2 来进行更加严格的筛选,然后再确定是否存在互作。加入的 3-AT 浓度过高,比较弱的相互作用可能被抑制,因此需要筛选 3-AT 的最适浓度。 本产品为 3-AT 母液,浓度为 2.5 M,经过过滤除菌处理。
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