试剂盒采用柱式法来提取全血RNA，无需使用红细胞裂解液裂解红细胞，操作简单，无需使用DNA酶也可以很好的吸附和去除基因组DNA，使用本试剂盒提取的RNA无蛋白和其他杂质污染，可用于RT-PCR、荧光定量PCR、体外翻译和分子克隆等多种下游实验。操作简单，用时短。
操作步骤：
1.在1.5mL离心管中加入300μL裂解液，向其中加入等体积的血液，震荡混匀，静置5min，然后4℃，12000rpm离心10-15min。
2.吸取上清到新的1.5mL离心管中，加入0.5倍上清体积的无水乙醇，混匀后加入到吸附柱中，4℃，12000rpm离心2min，弃滤液（留收集管，用于步骤4）。
3.将吸附柱放到干净的收集管上，在吸附柱中加入300μLRNA洗脱液（使用前请确认是否已加入无水乙醇），4℃，12000rpm离心2min，收集滤液。
4.在滤液中加入150μL无水乙醇，混匀后加入到新的吸附柱中（收集管使用步骤2中的收集管），4℃，12000rpm离心2min，弃滤液。
5.向离心管中加入500μL漂洗液Ⅰ（使用前请确认是否已加入无水乙醇），静置1min，4℃，12000rpm离心1min，弃滤液。
6.向离心管中加入600μL漂洗液Ⅱ（使用前请确认是否已加入无水乙醇），4℃，12000rpm离心1min，弃滤液。
7.重复操作步骤6。
8.4℃，12000rpm离心2min，将吸附柱敞口室温放置5min，以除去多余的乙醇。
9.将吸附柱放到一个干净的离心管上，向吸附柱中加入50-100μLRNase-freeddH2O，室温放置2min，4℃，12000rpm离心2min，得到RNA溶液，RNA保存于-80℃。
注意事项：
1.所有相关器皿耗材都应为RNase-free产品，操作过程要小心，带口罩、手套避免环境中RNA酶污染样品。
2.在提取RNA的过程中尽量在低温下操作。
3.避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH值变化，各溶液使用后应及时盖紧盖子。
4.尽量使用新鲜的血液进行RNA的提取。
5.洗脱液的体积不应少于50μL，体积过少会影响提取效率，RNA产物应保存在-80℃，以防RNA降解。
6.RNA浓度及纯度检测：提取的RNA片段可用琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计检测纯度与浓度。OD260/OD280比值应为2.0-2.2。 | 