博莱霉素的试验要点本篇告诉你

　　博莱霉素与铁的复合物嵌入DNA，引起DNA单链和双链断裂。不引起RNA链断裂。作用的第1步是本品的二噻唑环嵌入DNA的G-C碱基对之间，同时末端三肽氨基酸的正电荷和DNA磷酸基作用，使其解链。作用的第二步是本品与铁的复合物导致超氧或羟自由基的生成，引起DNA链断裂。口服无效，需经肌内或静脉注射。
 

　　博莱霉素的实验要点：
 

　　1、CTAB溶液在低于15℃时会析出沉淀，因此在将其加入冷冻的植物材料中之前必须预热。
 

　　2、在适条件下，DNA—CTAB沉淀呈白色纤维状，很容易一下子就从溶液中钩出。不过，某些植物种的DNA沉淀中可能含有杂质，特别是多糖，使DNA沉淀呈絮状或胶状，这种情况下可能需要稍事离心才能得到DNA.—CTAB沉淀。
 

　　3、饱和酚虽然可有效地使蛋白质变性，但酚不能*抑制RNA酶的活性,而且酚可以溶解含poLy(A)的mRNA。如果用苯酚和L仿的混合液，可减轻这两种现象，同时可加入适量的异戊醇(苯酚—L仿—异戊醇=25:24:1)，异戊醇的作用是消泡，并使蛋白质层紧密，使水相和有机相分层较好。
 

　　细菌的培养和收集将含有质粒pBS的DH5α菌种接种在LB固体培养基(含50μg/mlAmp)中,37℃培养12-24小时。用无菌牙签挑取单菌落接种到5mlLB液体培养基(含50μg/mlAmp)中,37℃振荡培养约12小时至对数生长后期。
 

　　非冻型组织RNA保存液小量提取法对于从大量转化子中制备少量部分纯化的质粒DNA十分有用。这些方法共同特点是简便、快速，能同时处理大量试样,所得DNA有一定纯度,可满足限制酶切割、电泳分析的需要。
 

　　博莱霉素特点如下：
 

　　1、非冻保存提取RNA用的新鲜组织，在37℃下可保存1天，25℃下可保存1周，4℃下可保存1月，在-20℃或-80℃下可长期保存。其间样品可反复冻融十多次。
 

　　2、应用范围广，可用于保存，邮寄和运输病毒、细菌、果蝇、植物组织、动物组织、培养细胞、悬浮细胞(白细胞、流式细胞仪收集的细胞)等。
 

　　3、兼容性广，RNALOCKER保存的样品可以直接用于RNA提取也可直接用于组织切片、免疫学和流式细胞分析。
 

　　4、结果准确，本产品进入细胞后能迅速锁定RNA水平，使实验结果更能准确反映取样时基因表达谱的真实状态。