梯度降温冻存盒在恢复室温的操作方法

　　梯度降温冻存盒是一种用于保存生物样本的容器，在进行快速冷冻冻存后，需要采取适当措施以使样本在恢复到室温时不受损害。它能够将样品快速地降温到低温状态，从而有效地延长样品的保存时间。
 

　　下面是操作方法：
 

　　1.取出冻存盒：将冻存盒从液氮罐中取出，放置于室温下的平坦表面上。
 

　　2.开启盖子：打开盒盖，并迅速将样本转移到预先准备好的接受样本的容器中。如果样本数量众多，可以使用专门的样本细胞解冻架，方便快捷。
 

　　3.渐进恢复温度：在室温下将容器中的样本缓慢升温至4℃，这个过程需要尽可能的缓慢，时间要求约为30分钟左右。
 

　　4.洗涤：在缓慢升温的同时，可以进行一定的洗涤过程，以去除掉DNase、RNase等杂质或污染。
 

　　5.细胞培养基底液：在恢复温度后，可以选择加入适量的细胞培养基底液进行培养以修复冻存造成的细胞损伤，具体添加量可以根据样本的情况而定。
 

　　6.培养条件：经过缓慢升温和培养基底液的加入后，可将样本置于恒温培养箱中进行培养。注意要控制好培养条件，如CO2浓度、湿度等。
 

　　总之，使用梯度降温冻存盒保存生物样本是一种常见的方法。在快速冷冻过程中，应尽可能减少样本受损害的风险，并且在恢复到室温时采取适当的渐进恢复温度的操作方法，以确保冻存样本的完整性和稳定性。