多酚氧化酶(PPO)测试盒能够捕捉到微小的酶活性变化
更新时间:2026-02-26 | 点击率:19
多酚氧化酶(PPO)测试盒的检测限低至0.01 U/mL,能够捕捉到微小的酶活性变化。基于朗伯-比尔定律实现线性响应,确保数据准确可靠;无需手动优化变量,简化实验流程,适合高通量筛选;适用于植物组织、食品加工及医学研究领域。可检测水果、蔬菜等多种样品类型,满足不同研究需求。
多酚氧化酶(PPO)测试盒的测定步骤:
-称取适量新鲜组织(如水果、蔬菜),加入提取缓冲液(含抗氧化剂如PVP或半胱氨酸,防止酶失活),冰浴匀浆。
-离心(4℃,8000-12000×g,15-30分钟),取上清液作为粗酶液,置于冰上备用。
-对照组:先加终止液(如SDS或盐酸),再依次加入底物(如邻苯二酚/儿茶酚)、缓冲液和粗酶液,混匀后立即记录初始吸光度(A)。
-实验组:按顺序加入缓冲液、底物、粗酶液,迅速混匀并开始计时,每隔一定时间(如30秒)取样,加入终止液终止反应,测定吸光度(A)。
-使用分光光度计在特定波长(如420nm,根据底物产物特性调整)下测定吸光度值。
多酚氧化酶(PPO)测试盒的使用注意事项:
-低温操作:全程冰浴,避免酶变性失活。
-抗氧化保护:提取缓冲液中添加PVP或半胱氨酸,抑制多酚类物质氧化干扰。
-快速操作:从取样到测定尽量在1小时内完成,减少酶活性损失。
-试剂保存:底物溶液需现用现配,避光保存;标准品(如有)按说明书条件储存。
-校准仪器:分光光度计需预热并校准波长,确保数据准确性。
-温度恒定:水浴锅或恒温箱维持反应温度(通常25-37℃)。
-pH稳定:使用缓冲液(如磷酸盐缓冲液),避免pH波动影响酶活性。
-底物浓度优化:通过预实验确定适底物浓度(如0.1-1.0 M邻苯二酚)。
-个人防护:佩戴手套、护目镜,避免接触强酸/碱或腐蚀性试剂。
-废液分类:含重金属或有毒试剂的废液需单独收集,按实验室规定处理。
-线性范围验证:确保吸光度变化在仪器线性范围内(通常0.1-1.0),必要时稀释样品。
-重复性检查:每组实验设置3次以上重复,计算平均值及标准差。

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