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葡聚糖凝胶G-75|Pharmacia进口现货

发表时间:2015-08-04  |  点击率:660

葡聚糖凝胶 G-75 Sephadex G-75
 
化学和物理性质
葡聚糖凝胶是一种珠状的凝胶,含有大量的羟基,很容易在水中和电解质溶
液中溶胀。G型的葡聚糖凝胶有各种不同的交联度,因此它们的溶胀度和分级分
离范围也有所不同。葡聚糖凝胶的溶胀度基本上不因盐和洗涤剂的存在而受影
响。
葡聚糖凝胶有不同的粒度。超细级的葡聚糖凝胶是用于需要分辨率的柱
色谱和薄层色谱。粗级和中级的凝胶用于制备性色谱过程,可在较低的压力下获
得较高的流速。另外,粗级也可用于批量工艺。
化学稳定性
葡聚糖凝胶不溶于一切溶剂(除非它被化学降解)。它在水、盐溶液、有机
溶剂、碱和弱酸性溶液中都是稳定的,在强酸中凝胶骨架的糖苷键被水解。长期接触氧化剂将破坏凝胶,因而应避免使用。
物理稳定性
葡聚糖凝胶并不熔融,可以在湿态、中性 PH 进行灭菌或在高压灭菌器 120
℃、 30 分钟而不影响它的色谱性质。干态的凝胶加热至120℃以上将开始焦糖化。
葡聚糖凝胶的机械强度取决于交联度。 
产品说明:
产  品  名  称  分  离  范  围  应   用
葡聚糖凝胶 G-10  <700  缓冲液交换、脱盐,分离小分子,去除小分子
葡聚糖凝胶 G-15  <1500  缓冲液交换、脱盐,分离小分子,去除小分子
葡聚糖凝胶 G-25  1000-5000  工业上脱盐及交换缓冲液
葡聚糖凝胶 G-50  1000-30000  多肽分离、脱盐、清洗生物提取液、分子量测定
葡聚糖凝胶 G-75  2000-70000  蛋白分离纯化、分子量测定、平衡常数测定
葡聚糖凝胶 G-100  2000-120000  蛋白分离纯化、分子量测定、平衡常数测定
葡聚糖凝胶 G-150  5000-300000  蛋白分离纯化、分子量测定、平衡常数测定
葡聚糖凝胶 G-200  5000-600000  蛋白分离纯化、分子量测定、平衡常数测定

使用方法:
1. 乙醇浸泡:
  在室温下,将干粉浸泡于 50-60%乙醇中至少 24 小时,并不断搅拌以保证凝胶
溶胀,用无盐水洗去残存的乙醇滤干;
2. 无盐水浸泡:
  室温下,在无盐水中充分溶胀 24 小时,间隙搅拌,以保证凝胶的完全溶胀,
然后;
3. 盐酸浸泡:
  在常温下再用 0.2N HCl 浸泡 12 小时,间隙搅拌,滤干,水洗只中性;
4. 将溶胀好的凝胶脱气后(真空抽滤或超声波)根据装柱要求一次性置入柱内,
注意保持湿态装柱,并避免柱内产生气泡或断层;
5.  上样前平衡层析柱至少 3-5 个柱体积直到记录仪基线变得平稳为止(流出液的
PH值等于上柱的 Buffer 的 PH值);
6.  凝胶过滤的上样量一般为 5%的柱床体积,我们建议初次上样控制在 1-2%的
床体积,视分离情况可以调整;脱盐时上样量可以达到20%的柱床体积,柱高的选择也与分离要求相关,柱高控制在 40-50cm  以下,过高的凝胶层会引起较大
的反压,应当尽可能避免。难分离物质要有一定柱高和流速控制,脱盐时高径比
为 5:1 即可;
7.  洗脱方法:
    可以用无盐水,也可以采用上柱时的缓冲液洗脱;在上柱 Buffer 中加入 NaCl
等梯度洗脱或盐梯度洗脱也可以完全分离纯化;
8.  在位清洗(CIP)
    凝胶使用十次后作一次 CIP,目的是去除柱床内沉淀的及顽固残留的蛋白。
方法是以 40cm/h 用 1M 氢氧化钠反向洗四个柱体积,再以至少三个柱体积平衡
缓冲液再生。
 
备注: 其它规格葡聚糖凝胶处理方法类似。

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