电话咨询:
021-54100800
技术文章
当前位置:首页 > 技术文章 > 如何测定蛋白浓度

如何测定蛋白浓度

发表时间:2013-02-17  |  点击率:1637

 如何测定蛋白浓度

 

考马斯亮蓝法(Bradford法)测定蛋白质浓度

1、试剂:

(1)考马斯亮蓝试剂:
考马斯亮蓝G—250 100mg溶于50ml 95%乙醇,加入100ml 85% H3PO4,用蒸馏水稀释至1000ml, 滤纸过滤。终试剂中含0.01%(W/V)考马斯亮蓝G—250, 4.7%(W/V)乙醇,8.5%(W/V)H3PO4。

(2)标准蛋白质溶液:
纯的牛血清血蛋白,根据其纯度同0.15mol/L NaCl配制成100 ug/ml蛋白溶液。

2. 器材: (1)可见光分光光度计 (2)旋涡混合器

3、标准曲线的制作
试管编号0123456
100ug/ml标准蛋白(ml)0.00.10.20.30.40.50.6
0.15mol/L NaCl (ml)10.90.80.70.60.50.4
考马斯亮蓝试剂 (ml)5555555
摇匀,1h内以0号管为空白对照,在595nm处比色
A595nm
以A595nm为纵坐标,标准蛋白含量为横坐标(六个点为10ug、20 ug、30 ug、40 ug、50 ug、60 ug),在坐标轴上绘制标准曲线。
4、样品中蛋白质含量的测定

另取两支干净的试管(做一重复),加入合适浓度的待测样品,使其测定值在标准曲线的范围内,测定方法同上,由样品液的吸光度查标准曲线即可求出含量。
注意事项:
1、 如果要求严格,好在试剂加入后的5~20min内测定光 吸收,因为这段时间内颜色是稳定的。

2、 若选择在旋涡混合器上混合,注意不要太剧烈,以免产生大量气泡而难于消除。
相关产品如下:





上海索莱宝生物科技有限公司

  话:      

 

  真:

  编:200233

  址:上海市钦江路1514

  箱:solarbio

  址:www.shsolarbio.com

 试剂 质量放心 价格低 为中国生物产业做贡献

蛋白浓度测定相关产品特价促销 

    

索宝特价  另有其他常用生化试剂超低价 欢迎询问


 

联系我们

contact us

咨询电话

15021977219

扫一扫 微信咨询




扫一扫访问手机站扫一扫访问手机站
访问手机站