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联系人: 马先生
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上海索莱宝生物科技有限公司
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谷胺酰胺合成酶(GS)试剂盒 说明书 技术文章
点击次数:480 发布时间:2019-06-05
  • 当前位置: 首页 > 生理生化试剂盒 > 微量酶标仪法 > 氨基酸系列 > 谷氨酰胺合成酶(Glutamine synthetase,GS)活性检测试剂盒

product-view

谷氨酰胺合成酶(Glutamine Synthetase,GS)活性检测试剂盒

商品货号:MS1807
英文名称:Micro Glutamine Synthetase(GS)Assay Kit
别名:谷氨酰胺合成酶试剂盒 GS Kit 谷氨酰胺合成酶(GS)试剂盒 谷氨酰胺合成酶(GS)测试盒
检测方法:微量法

 

商品货号:商品品牌:规格基本售价选择规格
MS1807-100管/48样索桥生物100管/48样¥550.00元 

 

  • 产品详细介绍

 

测定意义:

GS(EC 6.3.1.2)主要存在于植物中,是生物体内氨同化的关键酶之一,催化铵离子和谷氨酸合成谷氨酰胺,不仅可以防止过多的铵离子对生物有毒性,而且谷氨酰胺也是氨的主要储存和运输形式。

测定原理:

GS在ATP和Mg2+存在下,催化铵离子和谷氨酸合成谷氨酰胺;谷氨酰胺进一步转化为γ─谷氨酰基异羟肟酸,在酸性条件下与铁形成的络合物在540nm处有大吸收峰,可用分光光度计测定。

 

 

  •  
  • 产品说明书

 

货号: QS1807                                             规格:50管/24样

谷胺酰胺合成酶(Glutamine synthetase,GS)试剂盒说明书 可见分光光度法

正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定

测定意义:

GS(EC 6.3.1.2)主要存在于植物中,是生物体内氨同化的关键酶之一,催化铵离子和谷 氨酸合成谷氨酰胺,不仅可以防止过多的铵离子对生物有毒性,而且谷氨酰胺也是氨的主要储 存和运输形式。

测定原理:

GS 在 ATP 和 Mg2+存在下,催化铵离子和谷氨酸合成谷氨酰胺;谷氨酰胺进一步转化为 γ ─ 谷氨酰基异羟肟酸,在酸性条件下与铁形成红色的络合物;该络合物在 540nm 处有大吸收峰, 可用分光光度计测定。

自备实验用品及仪器:

可见分光光度计、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1 mL 玻璃比色皿、研钵、冰和 蒸馏水。

试剂的组成和配制:

提取液:30mL×1 瓶,4℃保存。

试剂一:10mL×1 瓶,-20℃保存。

试剂二:10mL×1 瓶,-20℃保存。

试剂三:粉剂×2 瓶,-20℃保存。用时每瓶加入 5mL 蒸馏水充分溶解备用,用不完的试 剂仍-20℃保                                                   存。

试剂四:10mL×1 瓶,4℃避光保存。

样本测定的准备:

1、细菌、细胞或组织样品的制备:

细菌或培养细胞:先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量(104 个):提取液体积(mL)为 500~1000:1 的比例(建议 500 万细菌或细胞加入 1mL 提取液),超 声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率 20%或 200W,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次);8000g 4℃ 离心 10min,取上清,置冰上待测。

组织:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g 组织, 加入 1mL 提取液),进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。

2、血清(浆)样品:直接检测。

测定步骤:

1、分光光度计预热 30min 以上,调节波长至 540nm,蒸馏水调零。

2、在 EP 管中加入下列试剂:

试剂名称(μ L)   测定管         对照管

试剂一         320

试剂二                       320

试剂三         140            140

样本          140            140

       混匀,37℃(哺乳动物)或 25℃(其他物种)准确水浴 30min

试剂四         200            200

混匀,静置 10min 后,5000g,25℃离心 10min,取上清液测定 540nm 处的吸光值 A。△A=A 测 定管-A 对照管。每个测定管需设一个对照管。 

GS 活力单位的计算:

1、血清(浆)GS 活性 单位定义:每 mL 血清(浆)在每 mL 反应体系中每 min 使 540 下吸光值变化 0.01 定义为一个 酶活力单位。

计算公式:

GS(U/mL)=Δ A×V 反总÷V 样÷0.01÷T =19×Δ A

2、组织、细菌或细胞 GS 活性

(1)按样本蛋白浓度计算:

单位的定义:每 mg 组织蛋白在每 mL 反应体系中每 min 使 540nm 下吸光值变化 0.01 定义为一 个酶活力单位。

GS(U/mg prot)=Δ A×V 反总÷(Cpr×V 样)÷0.01÷T =19×Δ A÷Cpr

(2)按样本鲜重计算:

单位的定义:每 g 组织在每 mL 反应体系中每 min 使 540nm 下吸光值变化 0.01 定义为一个酶 活力单位。

GS(U/g 鲜重)=Δ A×V 反总÷(W× V 样÷V 样总)÷0.01÷T =19×Δ A÷W

(3)按细菌或细胞密度计算 单位定义:每 1 万个细菌或细胞在每 mL 反应体系中每 min 使 540nm 下吸光值变化 0.01 定义 为一个酶活力单位。

GS(U/10^4 cell)=Δ A×V 反总÷(500×V 样÷V 样总)÷0.01÷T =0.038×Δ A

V 反总:反应体系总体积,0.8mL; V 样:加入样本体积,0.14mL;V 样总:加入提取液体积, 1 mL;T:反应时间,30 min;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样本质量,g;500:细菌或 细胞总数,500 万。

 

系列产品及单价

氮代谢系列    
QS1800硝酸还原酶(NR)测试盒可见分光光度法50管/24样240
MS1800硝酸还原酶(NR)测试盒微量法100管/48样450
QS1801谷氨酸合成酶(GOGAT)测试盒 紫外分光光度法50管/48样500
MS1801谷氨酸合成酶(GOGAT)测试盒微量法100管/96样950
QS1802谷氨酰胺酶(GLS)测试盒可见分光光度法50管/48样580
MS1802谷氨酰胺酶(GLS)测试盒微量法100管/96样1100
QS1803谷氨酸脱氢酶(GDH)测试盒紫外分光光度法50管/48样580
MS1803谷氨酸脱氢酶(GDH)测试盒微量法100管/96样1100
QS1805水土中亚硝酸盐含量测试盒可见分光光度法50管/48样140
MS1805水土中亚硝酸盐含量测试盒微量法100管/48样270
QS1806食品中亚硝酸盐含量测试盒可见分光光度法50管/48样200
MS1806食品中亚硝酸盐含量测试盒微量法100管/96样380
QS1807谷氨酰胺合成酶(GS)测试盒可见分光光度法50管/24样280
MS1807谷氨酰胺合成酶(GS)测试盒微量法100管/48样550
QS1808植物硝态氮测试盒可见分光光度法50管/48样360
MS1808植物硝态氮测试盒微量法100管/96样700
QS1811植物氨态氮测试盒可见分光光度法50管/48样500
MS1811植物氨态氮测试盒微量法100管/96样960
QS1812尿素氮测试盒可见分光光度法50管/48样70
MS1812尿素氮测试盒微量法100管/96样100
QS1813亚硝酸还原酶(NiR)测试盒可见分光光度法50管/24样650
MS1813亚硝酸还原酶(NiR)测试盒微量法100管/48样1250
QS1814脲酶(UE)测试盒可见分光光度法50管/24样380
MS1814脲酶(UE)测试盒微量法100管/48样750
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