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脂肪酸合成酶(FAS)活性试剂盒说明书 技术文章

发表时间:2019-06-06  |  点击率:621
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脂肪酸合成酶(Fatty Acid Synthase,FAS)活性试剂盒

商品货号:QS1108
英文名称:Fatty Acid Synthase (FAS) Assay Kit
别名:脂肪酸合成酶试剂盒 FAS Kit 脂肪酸合成酶(FAS)试剂盒 脂肪酸合成酶(FAS)测试盒
检测方法:常量法

 

商品货号:商品品牌:规格基本售价选择规格
QS1108-10 管/9 样索桥生物10 管/9 样¥1200.00元 
QS1108-25管/24样索桥生物25管/24样¥2000.00元 
QS1108-50管/48样索桥生物50管/48样¥3200.00元 

 

  • 产品详细介绍

 

测定意义:

FAS是脂肪酸合成关键酶,催化乙酰辅酶A和丙二酰辅酶A而生成长链脂肪酸。FAS普遍表达于各种组织细胞中,在哺乳动物肝、肾、脑、肺和乳腺以及脂肪组织中表达丰富。

测定原理:

FAS催化乙酰CoA、丙二酰CoA和NADPH生成长链脂肪酸和NADP+;NADPH在340nm有吸收峰,而NADP+没有;通过测定340nm 光吸收下降速率,计算FAS活性。

 

 

  • 产品说明书

 

货号:QS1108-50                       规格:50 管/48 样

脂肪酸合成酶(fatty acid synthase,FAS)活性试剂盒说明书 紫外分光光度法

 

注意:正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。

 

测定意义:

FAS 是脂肪酸合成关键酶,催化乙酰辅酶 A 和丙二酰辅酶 A 而生成长链脂肪酸。FAS 普遍 表达于各种组织细胞中,在哺乳动物肝、肾、脑、肺和乳腺以及脂肪组织中表达丰富。

 

测定原理:

FAS 催化乙酰 CoA、丙二酰 CoA 和 NADPH 生成长链脂肪酸和 NADP+;NADPH 在 340nm 有吸收 峰,而 NADP+没有;通过测定 340nm 光吸收下降速率,计算 FAS 活性。

 

自备实验用品及仪器:

研钵、冰、台式离心机、紫外分光光度计、1mL 石英比色皿、可调式移液枪和蒸馏水。

 

试剂组成和配制:

试剂一:液体 50mL×1 瓶,-20℃保存。用前 1 d 取出置于 4℃充分解冻后混匀。

试剂二:粉剂×1 支。临用前加入 1100 μ L 试剂四,充分溶解,用不完的试剂分装后-20℃ 保存,禁止反复冻融。

试剂三:粉剂×1 支,4℃避光保存。临用前加入 1100 μ L

试剂四,充分溶解,用不完的 试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。

试剂四:液体 50mL×1 瓶, 4℃保存。

试剂五:粉剂×1 瓶,4℃保存。临用前加入 2100μ L 试剂四,充分溶解,用不完的试剂 分装后-20℃避光保存,禁止反复冻融。

 

粗酶液提取:

1. 组织:按照组织质量(g):试剂一体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g 组织,加 入 1mL 试剂一)进行冰浴匀浆。12000g,4℃离心 40min,取上清置冰上待测。

2. 细菌、真菌:按照细胞数量(104个):试剂一体积(mL)为 500~1000:1 的比例(建议 500 万细胞加入 1mL 试剂一),冰浴超声波破碎细胞(功率 300w,超声 3 秒,间隔 7 秒,总时 间 3min);然后 12000g,4℃,离心 40min,取上清置于冰上待测。

3. 血清等液体:直接测定。

 

FAS 测定操作:

1. 分光光度计预热 30min,调节波长到 340 nm,蒸馏水调零。

2. 试剂四置于 40℃水浴中预热 30 min。

3. 测定管:在 1mL 石英比色皿中依次加入 100μ L 上清液、20μ L 试剂二、20μ L 试剂三、820μ L 试剂四和 40μ L 试剂五,迅速混匀后于 340nm 处测定吸光值,记录第 30s 和 90s 时吸光值,分 别记录为 A1 和 A2。△A 测=A1-A2。

 

FAS 活性计算公式:

(1)按照蛋白浓度计算 活性单位定义:37℃中每毫克蛋白每分钟氧化 1nmol NADPH 为 1 个酶活单位。

FAS(nmol/min/mg prot) =(△A÷ε ÷d×V 反总×109 ) ÷(Cpr×V 样)÷T =1608×△A÷Cpr

(2)按照样本质量计算

活性单位定义:37℃中每克组织每分钟氧化 1nmol NADPH 为 1 个酶活单位。

FAS(nmol/min/g 鲜重) = (△A÷ε ÷d×V 反总×109 ) ÷(W×V 样÷V 样总)÷T =1608×△A ÷W

(3)按细胞数量计算

活性单位定义:37℃中每 104个细胞每分钟氧化 1nmol NADPH 为 1 个酶活单位。

FAS(nmol /min/104 cell) = (△A÷ε ÷d×V 反总×109 ) ÷(细胞数量×V 样÷V 样总)÷T =1608×△A ÷细胞数量

(4)按液体体积计算

活性单位定义:37℃中每毫升样本每分钟氧化 1nmol NADPH 为 1 个酶活单位。

FAS(nmol /min/mL) =(△A÷ε ÷d×V 反总×109 ) ÷V 样÷T =1608×△A

ε :NADPH 摩尔消光系数,6.22×103 /mol/cm;d:比色皿光径,1 cm;V 反总:反应体系总体 积,1000μ L=0.001 L;Cpr:上清液蛋白质浓度,mg/mL;W:样本质量,g;V 样:加入反应 体系中上清液体积,100μ L=0.1 mL;T:反应时间,1min。

 

系列产品及单价

辅酶Ⅱ系列    
QS1100辅酶ⅡNADP(H)含量测试盒可见分光光度法50管/24样550
MS1100辅酶ⅡNADP(H)含量测试盒微量法100管/48样1000
QS1101NADP磷酸酶(NADPase)测试盒可见分光光度法50管/48样520
MS1101NADP磷酸酶(NADPase)测试盒微量法100管/96样980
QS11026-磷酸葡萄糖脱氢酶(G6PDH)/葡萄糖-6-磷酸脱氢酶测试盒紫外分光光度法50管/48样160
MS11026-磷酸葡萄糖脱氢酶(G6PDH)/葡萄糖-6-磷酸脱氢酶测试盒微量法100管/96样300
QS1103胞浆异柠檬酸脱氢酶(ICDHc)测试盒紫外分光光度法50管/48样260
MS1103胞浆异柠檬酸脱氢酶(ICDHc)测试盒微量法100管/96样500
QS1104NADP苹果酸酶(NADP-ME)测试盒紫外分光光度法50管/48样320
MS1104NADP苹果酸酶(NADP-ME)测试盒微量法100管/96样600
QS1105NAD-苹果酸酶(NAD-ME)测试盒紫外分光光度法50管/48样350
MS1105NAD-苹果酸酶(NAD-ME)测试盒微量法100管/96样650
QS11066-磷酸葡糖糖酸脱氢酶(6PGDH)测试盒紫外分光光度法50管/48样750
MS11066-磷酸葡萄糖酸脱氢酶(6PGDH)测试盒微量法100管/96样1400
QS1107肌酸激酶(CK)测试盒紫外分光光度法50管/48样820
MS1107肌酸激酶(CK)测试盒微量法100管/96样1500
QS1108-10脂肪酸合成酶(FAS)测试盒紫外分光光度法10管/9样1200
QS1108-25脂肪酸合成酶(FAS)测试盒紫外分光光度法25管/24样2000
QS1108-50脂肪酸合成酶(FAS)测试盒紫外分光光度法50管/48样3200
MS1108脂肪酸合成酶(FAS)测试盒微量法100管/96样6000
QS2508蔗糖磷酸化酶(SP)测试盒紫外分光光度法50管/48样1600
MS2508蔗糖磷酸化酶(SP)测试盒微量法100管/96样3000
QS1110硫氧还蛋白氧化还原酶(TrxR)测试盒可见分光光度法50管/48样250
MS1110硫氧还蛋白氧化还原酶(TrxR)测试盒微量法100管/96样450
QS1111谷胱甘肽还原酶(GR)测试盒紫外分光光度法50管/48样260
MS1111谷胱甘肽还原酶(GR)测试盒微量法100管/96样500

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