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植物α-淀粉酶(α-Amylase,α-AL)试剂盒 说明 技术文章
点击次数:565 发布时间:2019-06-12

当前位置: 首页 > 生理生化试剂盒 > 常量分光光度计法 > 淀粉系列 > 植物α-淀粉酶(α-amylase,α-AL)试剂盒

product-view

植物α-淀粉酶(α-Amylase,α-AL)试剂盒

商品货号:QS3401
英文名称:α-amylase Assay Kit
别名:植物α-淀粉酶(α-AL)活性检测试剂盒
检测方法:常量法

 

商品货号:商品品牌:规格基本售价选择规格
QS3401-50管/24样索桥生物50管/24样¥250.00元 

 

产品详细介绍

 

测定意义:

淀粉酶负责水解淀粉,包括α-淀粉酶和β-淀粉酶。α-淀粉酶(EC 3.2.1.1)可随机地作用于淀粉中的α-1,4-糖苷键,生成葡萄糖、麦芽糖、麦芽三糖、糊精等还原糖,同时使淀粉的粘度降低,因此又称为液化酶。

测定原理:

还原糖还原3,5-二硝基水杨酸生成棕红色物质。β-淀粉酶不耐热,在70℃钝化15min,从而测定α-淀粉酶活性。

 

产品说明书

货号:QS3401                规格:50 管/24 样

 

植物 α-淀粉酶(α-amylase,α-AL)试剂盒说明书 可见分光光度法

 

正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定

测定意义:

淀粉酶负责水解淀粉,包括 α -淀粉酶和 β -淀粉酶。α -淀粉酶(EC 3.2.1.1)可随机地作 用于淀粉中的 α -1,4-糖苷键,生成葡萄糖、麦芽糖、麦芽三糖、糊精等还原糖,同时使淀粉 的粘度降低,因此又称为液化酶。

测定原理:

还原糖还原 3,5-二硝基水杨酸生成棕红色物质。β -淀粉酶不耐热,在 70℃钝化 15min, 从而测定 α -淀粉酶活性。

自备实验用品及仪器:

可见分光光度计、恒温水浴锅、台式离心机、可调式移液器、玻璃比色皿、研钵和蒸馏水。

试剂的组成和配制:

试剂一:25mL×1 瓶,常温保存,若有黄色晶体析出,需 90℃加热溶解后再用;

试剂二:20mL×1 瓶,4℃保存,若有沉淀析出,需 70℃加热溶解后再用。

粗酶液提取:

组织:称取 0.1~0.2g 样本(建议称取约 0.1g 样本),加 1 mL 蒸馏水匀浆;将匀浆倒入离 心管中,在室温下放置提取 15min,每隔 5min 振荡 1 次,使其充分提取;3000g,25℃离心 10min, 吸取上清液并且加蒸馏水定容至 10 mL,摇匀,即为淀粉酶原液。

血清(浆):直接检测。

操作步骤和加样表(在 1.5mLEP 管中依次加入下列试剂):

1、 分光光度计预热 30min 以上,调节波长到 540 nm,蒸馏水调零。

2、 试剂一或试剂二 40℃预热 10min

3、测定步骤 

试剂(μ L)  对照管测定管 
α -淀粉酶原液 250250
70℃水浴 15min 左右,冷却
蒸馏水250 
试剂二 250
在 40℃恒温水浴中准确保温 5min
试剂一500500

   混匀,95℃水浴 5min,冷却, 540nm 处读取对照管和测定管吸光度,计算 Δ A=A 测定管-A 对照管。

α-淀粉酶活性计算:

1、标准条件下测定回归曲线为 y=3.7215x -0.1778; x 为标准品浓度(mg/mL),y 为吸光值。

2、α -淀粉酶活性

(1)按照样本质量计算

单位定义:每 g 组织每分钟催化产生 1mg 还原糖定义为 1 个酶活力单位。

α -淀粉酶活性(mg/min/g 鲜重)=[(Δ A+0.1778)÷3.7215×V 反总]÷(W×V 样÷V 样 总)÷T=1.075×(Δ A+0.1778)÷W

(2)按照蛋白质含量计算

单位定义:每 mg 组织蛋白每分钟催化产生 1mg 还原糖定义为 1 个酶活性单位。

α -淀粉酶活性(mg/min/mg prot)= [(Δ A+0.1778)÷3.7215×V 反总]÷(V 样×Cpr) ÷T=0.1075×(Δ A+0.1778) ÷Cpr

(3)血清(浆)样本中 α -淀粉酶活性计算

单位定义:每 mL 血清(浆)每分钟催化产生 1mg 还原糖定义为 1 个酶活性单位。

α -淀粉酶活性(mg/min/mL)= [(Δ A+0.1778)÷3.7215×V 反总]÷V 样÷T=0.1075×(Δ A+ 0.1778)

V 反总:反应体系总体积,0.5mL;V 样:加入反应体系中样本体积,0.25 mL;V 样总:提取 液总体积,10 mL; Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样本质量,g;T:反应时间,5min。

 

淀粉系列   价格 
QS3400 淀粉含量测试盒可见分光光度法50管/48样260
MS3400 淀粉含量测试盒微量法100管/96样500
QS3401α-淀粉酶测试盒可见分光光度法50管/24样250
MS3401α-淀粉酶测试盒微量法100管/48样480
QS3402β-淀粉酶测试盒可见分光光度法50管/24样460
MS3402β-淀粉酶测试盒微量法100管/48样900
QS3403-50ADPG焦磷酸化酶(AGP)测试盒紫外分光光度法50管/48样2300
QS3403-25ADPG焦磷酸化酶(AGP)测试盒紫外分光光度法25管/24样1600
MS3403ADPG焦磷酸化酶(AGP)测试盒微量法100管/96样4400
QS3404-50可溶性淀粉合成酶(SSS)测试盒紫外分光光度法50管/48样3200
QS3404-25可溶性淀粉合成酶(SSS)测试盒紫外分光光度法25管/24样2000
MS3404可溶性淀粉合成酶(SSS)测试盒微量法100管/96样6000
QS3405-50结合态淀粉合成酶(GBSS)测试盒紫外分光光度法50管/48样3200
QS3405-25结合态淀粉合成酶(GBSS)测试盒紫外分光光度法25管/24样2000
MS3405结合态淀粉合成酶(GBSS)测试盒微量法100管/96样6000
QS3406淀粉分支酶(SBE)测试盒可见分光光度法50管/24样850
MS3406淀粉分支酶(SBE)测试盒微量法100管/48样1600
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