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植物 β-淀粉酶(β-Amylase,β-AL)试剂盒 说明 技术文章

发表时间:2019-06-12  |  点击率:752

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植物 Β-淀粉酶(Β-Amylase,Β-AL)试剂盒

商品货号:QS3402
英文名称:β-amylase Assay Kit
别名:植物β-淀粉酶(β-AL)活性检测试剂盒
检测方法:常量法

 

商品货号:商品品牌:规格基本售价选择规格
QS3402-50管/24样索桥生物50管/24样¥460.00元 

 

产品详细介绍

 

测定意义:

淀粉酶负责水解淀粉,主要包括α-淀粉酶和β-淀粉酶。β-淀粉酶(EC 3.2.1.2)可随机地作用于淀粉中的α-1,4-糖苷键,生成葡萄糖、麦芽糖、麦芽三糖、糊精等还原糖。

测定原理:

还原糖还原3,5-二硝基水杨酸生成棕红色物质。α-淀粉酶不耐酸,β-淀粉酶不耐热。根据上述特性,钝化其中之一,就可测出另一种淀粉酶的活力。

 

产品说明书

货号:QS3402                规格:50 管/24 样

 

  植物 β -淀粉酶(β -amylase,β -AL)试剂盒说明书

        可见分光光度法

 

正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定

测定意义:

淀粉酶负责水解淀粉,主要包括 α -淀粉酶和 β -淀粉酶。β -淀粉酶(EC 3.2.1.2)可随机 地作用于淀粉中的 α -1,4-糖苷键,生成葡萄糖、麦芽糖、麦芽三糖、糊精等还原糖。

测定原理:

还原糖还原 3,5-二硝基水杨酸生成棕红色物质。α -淀粉酶不耐酸,β -淀粉酶不耐热。 根据上述特性,钝化其中之一,就可测出另一种淀粉酶的活力。

自备实验用品和仪器:

可见分光光度计、恒温水浴锅、离心机、可调式移液器、玻璃比色皿、研钵和蒸馏水。

试剂的组成和配制:

试剂一:50mL×1 瓶,常温保存,若有黄色晶体析出,需 90℃加热溶解后再用;

试剂二:40mL×1 瓶,4℃保存,若有沉淀析出,需 70℃加热后再用。

粗酶液提取:

组织:称取 0.1~0.2g 样本(建议称取约 0.1g 样本),加入 1mL 蒸馏水,研磨匀浆;将匀 浆倒入离心管中,提取液在室温下放置提取 15min,每 5min 振荡 1 次,使其充分提取;3000g, 25℃离心 10min,取上清液加蒸馏水定容至 10 mL,摇匀,即淀粉酶原液。

吸取上述淀粉酶原液 1mL,加入 4mL 蒸馏水,摇匀,即为淀粉酶稀释液,用于(α +β ) 淀粉酶总活力的测定。

血清(浆)等液体样本:(1)直接检测 α -淀粉酶。(2)吸取淀粉酶原液 1mL,加入 4mL 蒸馏水,摇匀,即为淀粉酶稀释液,用于(α +β )淀粉酶总活力的测定。

测定步骤:

1、 分光光度计预热 30min 以上,调节波长到 540 nm,蒸馏水调零。

2、 试剂一和试剂二 40℃预热 10min。

3、测定操作表:

试剂名称(μ L)α -淀粉酶活力测定总淀粉酶活力测定
对照管测定管对照管测定管
淀粉酶原液250250  
70℃水浴 15min 左右,冷却
淀粉酶稀释液  250250
蒸馏水250 250 
试剂二 250 250
在 40℃恒温水浴中准确保温 5min
试剂一500500500500

混匀,95℃水浴 5min,冷却,在 540nm 下测定吸光度,从左到右分别记为 A1、A2、A3 和 A4。

酶活性计算:

1、标准条件下测定回归曲线为 y=3.7215x -0.1778; x 为标准品浓度(mg/mL),y 为吸光值。

2、α -淀粉酶活性

(1)按照样本质量计算

单位定义:每 g 组织每分钟催化产生 1mg 还原糖定义为 1 个酶活力单位。

α -淀粉酶活性(mg/min/g鲜重)=[(A2-A1+0.1778)÷3.7215×V反总]÷(W×V样÷V样总)÷T =1.075×(A2-A1+0.1778)÷W

(2)按照蛋白质含量计算

单位定义:每 mg 组织蛋白每分钟催化产生 1mg 还原糖定义为 1 个酶活性单位。

α -淀粉酶活性(mg/min/mg prot)= [(A2-A1+0.1778)÷3.7215×V 反总]÷(V 样×Cpr)÷T =0.1075×(A2-A1+0.1778) ÷Cpr

(3)血清(浆)等液体样本中 α -淀粉酶活性计算

单位定义:每 mL 血清(浆)每分钟催化产生 1mg 还原糖定义为 1 个酶活性单位。

α -淀粉酶活性(mg/min/mL)= [(A2-A1+0.1778)÷3.7215×V 反总]÷V 样÷T=0.1075×(A2-A1 +0.1778)

3、总淀粉酶活性计算

(1)按照样品质量计算

单位定义:每 g 组织每分钟催化产生 1mg 还原糖定义为 1 个酶活力单位。

总淀粉酶活性(mg/min//g 鲜重)=5×[(A4-A3+0.1778)÷3.7215×V 反总]÷(W×V 样÷V 样 总)÷T=5.375×(A4-A3+0.1778)÷W

(2)按照蛋白质含量计算

单位定义:每 mg 组织蛋白每分钟催化产生 1mg 还原糖定义为 1 个酶活力单位。

总淀粉酶活性(mg/min/mg prot)=5×[(A4-A3+0.1778)÷3.7215×V 反总]÷(V 样×Cpr)÷T =0.5375×(A4-A3+0.1778) ÷Cpr

(3)血清(浆)等液体样本中总淀粉酶活性计算

单位定义:每 mL 血清(浆)每分钟催化产生 1mg 还原糖定义为 1 个酶活性单位。

总淀粉酶活性(mg/min/mL) =5×[(A4-A3+0.1778)÷3.7215×V 反总]÷V 样÷T =0.5375×(A4-A3+0.1778)

4、β -淀粉酶活性计算

(1)按照样本质量计算

单位定义:每 g 组织在反应体系中每分钟催化产生 1mg 还原糖定义为 1 个酶活力单位。

β - 淀粉酶活性 (mg/min/g 鲜 重 )= 淀 粉 酶 总 活 性 -α - 淀粉酶活性 =[5.375×(A4-A3 + 0.1778)-1.075×(A2-A1+0.1778)]÷W

(2)按照蛋白质含量计算

单位定义:每 mg 组织蛋白每分钟催化产生 1mg 还原糖定义为 1 个酶活力单位。

β -淀粉酶活性(mg/min/mg prot)=淀粉酶总活性-α -淀粉酶活性=[0.5375×(A4-A3+ 0.1778)-0.1075×(A2-A1+0.1778)]÷Cpr

(3)血清(浆)等液体样本中 β -淀粉酶活性计算

单位定义:每 mL 血清(浆)每分钟催化产生 1mg 还原糖定义为 1 个酶活性单位。

β - 淀 粉 酶 活 性 ( mg/min/mL ) = 淀 粉 酶 总 活 性 -α - 淀 粉 酶 活 性 =0.5375×(A4-A3 + 0.1778)-0.1075×(A2-A1+0.1778)

5:总淀粉酶稀释倍数;V 反总:反应体系总体积,0.5mL;V 样:加入反应体系中样本体积,0.25 mL;V 样总:提取液总体积,10 mL; Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样本质量,g; T:反应时间,5min。

 

淀粉系列   单价
QS3400 淀粉含量测试盒可见分光光度法50管/48样260
MS3400 淀粉含量测试盒微量法100管/96样500
QS3401α-淀粉酶测试盒可见分光光度法50管/24样250
MS3401α-淀粉酶测试盒微量法100管/48样480
QS3402β-淀粉酶测试盒可见分光光度法50管/24样460
MS3402β-淀粉酶测试盒微量法100管/48样900
QS3403-50ADPG焦磷酸化酶(AGP)测试盒紫外分光光度法50管/48样2300
QS3403-25ADPG焦磷酸化酶(AGP)测试盒紫外分光光度法25管/24样1600
MS3403ADPG焦磷酸化酶(AGP)测试盒微量法100管/96样4400
QS3404-50可溶性淀粉合成酶(SSS)测试盒紫外分光光度法50管/48样3200
QS3404-25可溶性淀粉合成酶(SSS)测试盒紫外分光光度法25管/24样2000
MS3404可溶性淀粉合成酶(SSS)测试盒微量法100管/96样6000
QS3405-50结合态淀粉合成酶(GBSS)测试盒紫外分光光度法50管/48样3200
QS3405-25结合态淀粉合成酶(GBSS)测试盒紫外分光光度法25管/24样2000
MS3405结合态淀粉合成酶(GBSS)测试盒微量法100管/96样6000
QS3406淀粉分支酶(SBE)测试盒可见分光光度法50管/24样850
MS3406淀粉分支酶(SBE)测试盒微量法100管/48样1600

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