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ELISA标本收集

发表时间:2012-06-04  |  点击率:1264

 ELISA标本收集

在收集标本前都必须有一个完整的计划,必须清楚要检测的成份是
否足够稳定。我们提倡新鲜标本尽早检测,对收集后当天就进行
检测的标本,及时储存在4℃备用,如有特殊原因需要周期收集标
本,请造模取材后,将标本及时分装后放在-20℃或-70℃条件下
保存。因冰室与室温存在一定温差,蛋白极易降解,直接影响实验
质量,所以避免反复冻融。代测标本的客户取材前须向我司销售人
员索要说明书,具体操作注意事项请与我司技术人员沟通。
ELISA标本一般包括血清、血浆、尿液、细胞培养上清、组织标
本、胸腹水、脑脊液等。
血清:
室温血液自然凝固10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转
/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
血浆:
应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合
10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上
清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
尿液:
用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集
上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参
照此实行。
细胞培养上清:
检测分泌性的成份时, 用无菌管收集。离心2 0 分钟左右
(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用
PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。
通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左
右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形
成,应再次离心。
组织标本:
切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速
冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的
PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左
右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其
余冷冻备用。
脑脊液标本:
脑脊液标本采集后立即送检,放置过久将影响检验结果:如细胞变
性,破坏,导致计数和分类不准;有些化学物质如葡萄糖等将分解
含量减少;细菌发生自溶影响细菌的检出率。脑脊液抽取后一般分
装三个无菌管,*管作细菌培养,第二管作化学分析和免疫学检
查,第三管作一般性状及显微镜检查,三管的顺序不宜颠倒。因标
本采集较难,全部送检和检测过程应注意安全。
胸腹水标本:
与脑脊液标本一样,采集后的标本注意安全,及时送检。一般也分
装三管,一管作常规细胞学检查,一管生化检查,一管细菌培养,
顺序以与脑脊液相同为宜

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