甘油激酶（Glycerol Kinase，GK，EC 2.7.1.30）是糖代谢途径中的关键酶，在生物体内负责甘油的摄取和代谢，它催化甘油磷酸化是糖代谢途径中的首步。通过测定甘油激酶的活性，可以了解糖代谢的状况，有助于疾病的诊断和治疗。
甘油在甘油激酶（GK）的作用下生成甘油磷酸，甘油磷酸氧化酶（GPO）将甘油磷酸氧化产生过氧-化氢，过氧-化氢和4-氨基安替比林及2，4-二氯酚生成红色产物，在505nm处有特征吸收峰，据此可以计算甘油激酶的活性。
