该试剂盒对经典的异硫氰酸胍抽提RNA的方法进行了改良。改良后的裂解液能迅速裂解细胞，释放出RNA的同时灭活RNase。RNA在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜上，再通过一系列漂洗和离心等步骤进一步将蛋白等杂质去除，最后用RNase-FreeddH2O将RNA从硅基质膜上洗脱。本试剂盒操作快速便捷，安全无需使用酚、氯仿等有毒试剂，操作安全。
操作步骤：
1、称取25mg左右组织，每管加入600μL裂解液，使用两颗小钢珠破碎，破碎后，冰浴放
置5min。
2、向吸附柱中加入步骤1破碎后的混合液，4℃13000rpm离心3min，倒掉收集管中的废
液，将吸附柱重新放回收集管中。
3、向吸附柱中加入600μL洗涤液(使用前请先检查是否已加入无水乙醇)，4℃13000rpm离
心2min，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。
4、向吸附柱中加入50μLDnase酶（直接加入至白色柱底），静置10~15min。
5、向吸附柱中加入600μL漂洗液(使用前请先检查是否已加入无水乙醇)，4℃13000rpm离
心2min，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。
6、重复操作步骤5。
7、4℃13000rpm空离2min，将吸附柱敞口室温放置3min，以除去多余的乙醇。
8、将吸附柱放到一个干净的离心管上，向吸附柱中加入30-100μL洗脱液，室温放置2min，4℃，13000rpm离心1min，得到RNA溶液，RNA保存于-80℃。
注意事项：
1、所有相关器皿耗材都应为RNase-free产品，操作过程要小心，带口罩、手套避免环境中RNA酶污染样品。
2、洗脱液的体积不应少于30μL，体积过少会影响提取效率，RNA产物应保存在-80℃，以防RNA降解。
3、RNA浓度及纯度检测：提取的RNA片段可用琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计检测浓度与纯度。OD260/OD280比值应为2.0-2.2。 | 