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R2021 磁珠法提取细菌RNA试剂盒 说明书仅供参考

发表时间:2026/9/22  |  点击率:12
 
提 供 商: 上海索宝生物科技有限公司 资料大小: PNG
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磁珠法提细菌RNA剂盒,使细菌在裂解液(不含Trizol,氯仿等有毒试剂)中裂解完-全后,在结合液的作用下,使RNA与磁珠特异性地识别和高效的结合,经漂洗,洗脱后,在外加磁场力的作用下能从样品中分离出RNA,无需添加DNaseI酶就能获得干净的RNA条带。提取的基因组RNA纯度高A260/A280比率介于2.0-2.1之间,基本没有DNA和蛋白质污染,可以应用到各类分子生物学下游实验,适用于革兰氏阴性菌。
优势:
磁珠法提取细菌RNA具有传统柱式法无法-比拟的优势。与柱式法相比大大缩短了实验时间,15-20分钟就可提取到条带清晰,浓度高的RNA。具有操作简单,用时短,安全无毒,可完成自动化提取等优势。
操作步骤(仅供参考):
使用前请先在漂洗液中加入无水乙醇,加入体积请参照瓶体上的标签。(每瓶需要单独加入30mL无水乙醇)
1.于1.5mLEP管中加入用LB培养过夜的新鲜菌液1mL,12000rpm离心1min,尽量吸除上清。
2.向菌体中加入200μL溶菌酶缓冲液,50μL溶菌酶溶液,移液枪吹吸混匀,室温5min。
3.加入350μL裂解液,移液枪吹吸混匀,室温静置2min。
4.加入600μL无水乙醇,用移液枪吹吸混匀。
5.加入20μL磁珠,涡旋震荡混匀,室温静置5min。将EP管置于磁力架中进行磁分离,待磁珠完-全吸附于磁力架后,去除上清,沿管壁尽量将液体吸除干净,注意不要吸到磁珠。
6.加入600μL的漂洗液(使用前请检查是否已加入乙醇),用涡旋振荡器震荡混匀。将离心管放置于磁力架中,待磁珠完-全吸附于磁力架后,去除上清,沿管壁尽量将液体吸除干净,注意不要吸到磁珠。
7.重复第6步操作。
8.打开离心管的盖子,于室温中静置干燥1min注意干燥时间不能太久,会使得磁珠上的RNA不易被洗脱。
9.加洗脱液40-100μL,涡旋混匀,室温静置5min,将离心管置于磁力架中,待磁珠完-全吸附于磁力架后,用移液枪沿管壁将溶液吸到新的离心管(RNA专用无酶无菌EP管)中,注意不要吸到磁珠,所得溶液即为纯化后的RNA样品,放于-20℃保存。
注意事项:
1.磁珠使用前用涡旋震荡器震荡混匀。
2.磁珠置于4℃冰箱保存。
3.冷冻,干燥和离心等操作会引起磁珠团聚,不易于重悬和分散,并影响磁珠表面功能基团的化学活性。
4.样品应避免反复冻融,否则会导致提取量下降。

 
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