异硫氰酸胍/苯酚法异硫氰酸胍/苯酚法是一种传统的RNA提取方法，适用于大部分动植物材料，但对于次生代谢产物较多的植物材料提取RNA效果较差。异硫氰酸胍能使核蛋白复合体解离，并将RNA释放到溶液中，采用酸性酚/氯仿混合液抽提，低pH值的酚将使RNA进入水相，而蛋白质和DNA仍留在有机相，从而可以完成RNA的提取工作。Solarbio公司的Trizol和总RNA...

DNA的储存储存溶液：DNA为两性解离分子，在碱性条件下较稳定，因此一般用TE（pH8.0）保存。TE的成分为：10mMTris-HCl（Tris与盐酸形成强的缓冲对）；1mMEDTA（乙二胺四乙酸，能螯合二价金属阳离子，抑制DNase的活性）；pH8.0（碱性条件可减少DNA的脱氨作用，防止降解）。ddH2O的正常pH值为7.0，可作为DNA的储存液，但有...

基因组DNA提取的原则1、保证核酸一级结构的完整性（因为遗传信息全部储存在核酸一级结构中，故完整的一级结构是保证核酸结构与功能研究的基础）。2、排除其它分子（如蛋白质、多糖、脂类、有机溶剂等）的污染，使下游试验顺利进行。

RNA纯化及获得纯化要求RNA样品中不应存在对酶（如逆转录酶）有抑制作用的有机溶剂和过高浓度的金属离子。避免其它生物大分子如蛋白质、多糖和脂类分子的污染。排除DNA分子的污染。纯化方法及沉淀1、有机溶剂抽提法氯仿抽提：在使用RNA提取试剂进行RNA提取时，常使用氯仿进行抽提，以去除蔗糖、蛋白等杂质，并促进水相与有机相的分离，从而达到纯化RNA的目的。沉淀：氯...

RNA评价与鉴定提取得到RNA溶液后，我们需要对RNA进行相关的质量检测，以确定它是否符合后续实验的要求。RNA用于不同的后续实验，对其质量要求不尽相同。cDNA文库构建要求RNA完整且无酶等抑制物残留；Northernblot实验对RNA完整性要求较高，对酶反应抑制物残留要求较低；RT-PCR实验对RNA完整性要求不太高，但对酶反应抑制物残留要求严格。因此...

RNA的保护与DNA提取实验相比，RNA的提取实验常常较为困难，这主要是由于RNA非常容易降解。而造成RNA降解的原因来自内因和外因两个方面。内因：RNA核糖残基的2’和3’位置带有羟基，易被水解；外因：生物体内和外部环境中存在大量RNase，并且RNase不易失活，高温后仍然能够正确折叠恢复活性。因此，从样品的储存、RNA的提取以及RNA提取完成后的保存，...

细胞从培养皿上的解离以下通用步骤可以在保持细胞完整性的同时从培养器皿中分离多种细胞系。但这一步骤不能广泛适用于所有细胞系。应通过实验来确定不同体系所需的佳条件和浓度。・在传代培养时监测细胞存活率。・细胞存活率应大于90%。・对于无血清培养基，建议降低胰酶用量。1．去除器皿中原有细胞培养基。2．用不含钙镁的平衡盐溶液或EDTA清洗细胞。将清洗溶液加到培养瓶中与...

原代组织细胞的解离从原代组织上获取单个细胞悬液的常用方法是利用酶的解聚作用。尽量缩短用酶处理细胞的时间，以获得高的存活率。按下面的方法解聚整个组织，以获得大量细胞。胰酶1．先去除无关组织，然后用灭菌的解剖刀或剪刀将组织切成3-4mm大小碎块。通过在不含钙镁的平衡盐溶液进行重悬来清洗组织碎块。待组织碎块沉降后去掉上清液。重复清洗2-3次。2．将装有组织碎块的容...

深低温保藏细胞的解冻深低温保藏的细胞十分脆弱，要轻柔操作。快速解冻深低温保藏的细胞，然后直接将其接种到*生长培养基中，如果细胞对抗冻剂（DMSO或甘油）特别敏感，则离心除去抗冻剂，然后将细胞接种到*生长培养基中。下面是深低温保藏细胞的建议解冻步骤：直接接种法1．从冻存管中取出细胞，用37℃水浴快速解冻。2．将细胞直接接种到*生长培养基中。每毫升冻存细胞需要1...

使用抗生素和抗真菌素进行去污培养当不可替代的培养细胞发生污染时，研究人员可以尝试消除或控制污染。首先，确定污染类型是细菌、真菌、支原体还是酵母。将污染的培养物与其他细胞系隔离。实验用消毒剂清洗培养箱和层流通风橱，检查HEPA（粒子空气）过滤器。高浓度的抗生素和抗真菌素可能对某些细胞系有毒害作用。因此，应测定剂效关系以确定抗生素和抗真菌素的毒性剂量。这一点在使...

DNA产物纯化试剂盒简介：对于TA克隆、酶切或者直接测序等试验来说，纯化PCR产物或酶切产物是非常必要的。以TA克隆为例，其成功率跟目的片段的纯度高低具有重要关系。虽然未经过纯化的PCR产物也可以跟载体连接，但会增加筛选阳性克隆的难度，因为PCR产物中的dNTP和引物等可能也会跟载体连接。在进行连接试验时，这些非特异性的产物会跟特异性产物相互竞争，从而导致连...

质粒提取试剂盒简介：质粒（Plasmid）是一种染色体外的稳定遗传因子，大小从1-200kb不等，为双链、闭环的DNA分子，并以超螺旋状态存在于宿主细胞中。质粒主要存在于细菌、放线菌和真菌细胞中，它具有自主复制和转录能力，能在子代细胞中保持恒定的拷贝数，并表达所携带的遗传信息。质粒提取原理及流程：较常用的质粒DNA提取方法有3种：碱裂解法、煮沸法和去污剂（如...

基因组DNA提取试剂盒简介：DNA是遗传信息的载体，是重要的生物信息分子，是分子生物学研究的主要对象，为了进行测序、杂交、基因表达、文库构建等试验，获得高分子量和高纯度的基因组DNA是非常重要的前提，因此基因组DNA的提取也是分子生物学试验技术中重要、基本的操作之一。Solarbio公司提供各种不同样品基因组DNA提取试剂盒，如植物、动物、细菌、细胞、血液、...

系列SABC试剂盒使用说明书TNFα免疫组化染色试剂盒产品编号：SA2041保存：4℃冷藏有效期：一年工作原理：TNFα是肿瘤坏死因子α抗原，该蛋白和诱导细胞的快速死亡有关。抗体：兔抗TNFα抗原，亲和纯化抗体。适宜种属：人、大鼠、小鼠组织。标本处理：细胞涂片，冰冻和石蜡切片。染色模式：细胞浆。试剂盒内容：1．5％BSA封闭液2ml或5ml，组织切片的封闭。...

活性氧检测试剂盒一．产品简介：活性氧检测试剂盒（Reactiveoxygenspeciesassaykit）是一种利用荧光探针DCFH-DA进行活性氧检测的试剂盒。DCFH-DA本身没有荧光，可以自由穿过细胞膜，进入细胞内后，可以被细胞内的酯酶水解生成DCFH。而DCFH不能通透细胞膜，从而使探针很容易被装载到细胞内。细胞内的活性氧可以氧化无荧光的DCFH生...