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可溶性果胶含量检测 说明 技术文章
点击次数:495 发布时间:2019-06-04
  • 当前位置: 首页 > 生理生化试剂盒 > 微量酶标仪法 > 果胶系列 > 可溶性果胶含量检测试剂盒

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可溶性果胶含量检测试剂盒

商品货号:MS2635
英文名称:Soluble pectin Assay Kit
别名:可溶性果胶含量测试盒
检测方法:微量法

 

商品货号:商品品牌:规格基本售价选择规格
MS2635-100管/48样索桥生物100管/48样¥950.00元 

 

  • 产品详细介绍

测定意义:

果胶是构成细胞初生壁和中胶层的主要成分,主要由原果胶、果胶酸甲酯和果胶酸组成。果胶中含有半乳糖醛酸、乳糖、阿拉伯糖、葡萄糖醛酸等,是许多高等植物细胞壁中含量丰富的多糖成分,其独特的物理、化学性质影响着植物源食品的口感和品质。果胶间以Ca2+桥及其他离子键、氢键、糖苷键、酯键和苯环偶联的方式交联,通过不同的抽提方法可以提取各种形式的果胶,如水溶性果胶(WSP)、离子结合型果胶ISP和共价结合果胶(CSP)。

测定原理:

利用酸溶液提取得到WSP可溶性果胶,采用咔唑比色法测定果胶含量。果胶水解成半乳糖醛酸,在硫酸溶液中与咔唑试剂进行缩合反应,生成物质在530 nm处有大吸收峰。

 

 

  •  
  • 产品说明书
  •  

 

货号: MS2635                    规格:100 管/48 样

可溶性果胶(WSP)含量试剂盒说明书 可见分光光度法

注意:正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。

测定意义:

果胶是构成细胞初生壁和中胶层的主要成分,主要由原果胶、果胶酸甲酯和果胶酸组成。 果胶中含有半乳糖醛酸、乳糖、阿拉伯糖、葡萄糖醛酸等,是许多高等植物细胞壁中含量丰 富的多糖成分,其独特的物理、化学性质影响着植物源食品的口感和品质。果胶间以 Ca2+桥及 其他离子键、氢键、糖苷键、酯键和苯环偶联的方式交联,通过不同的抽提方法可以提取各种 形式的果胶,如水溶性果胶(WSP)、离子结合型果胶(ISP)和共价结合果胶(CSP)。

测定原理:

利用酸溶液提取得到(WSP)可溶性果胶,采用咔唑比色法测定果胶含量。果胶水解成半 乳糖醛酸,在硫酸溶液中与咔唑试剂进行缩合反应,生成物质在 530 nm 处有大吸收峰。 

自备实验用品及仪器:

可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、可调式移液器、微量石英玻璃比色皿/96 孔板、80% 乙醇、丙酮、浓硫酸(不允许快递)、研钵和蒸馏水。

试剂的组成和配制: 

试剂一:液体 100mL× 1 瓶,4℃保存。

试剂二:液体 100mL× 1 瓶,4℃保存。

试剂三:标准液 1mL× 1 支,4℃保存。

试剂四:液体 5 mL× 1 瓶,4℃保存;

样品的前处理:

1、 细胞壁的提取:取约 0.3g 样本,加入 1mL 80%乙醇,室温快速匀浆,95℃水浴 20min, 冷却至室温,4000g 25℃离心 10min,弃上清。沉淀加入 1.5mL80%乙醇和丙酮各洗一遍(涡 旋振荡 2min 左右,4000g 25℃离心 10min,弃上清即可),沉淀即为粗细胞壁,加入 1mL 试剂一(去除淀粉)浸泡 15 小时,4000g 25℃离心 10min,弃上清,将沉淀干燥,称重得 细胞壁物质(CWM)。

2、 WSP 的提取:称取烘干的 CWM 3mg,加入 1mL 试剂二,充分匀浆。8000g 4℃离心 10min, 取上清液待测。

测定步骤:

1、分光光度计或酶标仪预热 30min 以上,调节波长至 530nm 处,蒸馏水调零;试剂三和试剂 四 37℃预热 10min 以上; 

2、操作表:

试剂名称(µL)      空白管      标准管         对照管        测定管  

待测样本                                50            50

试剂三                      50

蒸馏水          50                       50

试剂四           50           50                      50

浓硫酸           400          400           400          400

混匀,95℃水浴 5min 后,冷却至室温,取 200µL 至微量石英比色皿或 96 孔板中,530nm 处读 取吸光值,空白管、标准管、对照管和测定管吸光值分别记为 A1、A2、A3 和 A4。若 A 大于 2, 需将待测样本用蒸馏水稀释(可稀释 10 倍或 20 倍)。空白管和标准管只要做一管,每个测定 管需设一个对照管。

WSP 含量计算:

WSP 含量(mg /g 干重)= (C 标准×V1) ×(A4-A3)÷(A2-A1)÷(W×V1÷V2) ×稀释倍数 =0.05×(A4-A3)÷(A2-A1)÷W×稀释倍数

C 标准:标准管浓度,0.05mg/mL;V1:加入样本体积,0.05mL;V2:加入提取液体积,1mL;

W:样本干重,g。

注意:低检测限为 50μ g /g 干重

 

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