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BCA 法蛋白含量测定试剂盒 说明 技术文章

发表时间:2019-06-11  |  点击率:1181
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BCA 法蛋白含量测定试剂盒

商品货号:QS3202
英文名称:BCA Protein Assay Kit
别名:BCA法蛋白含量测定试剂盒
检测方法:常量法

 

商品货号:商品品牌:规格基本售价选择规格
QS3202-50管/48样索桥生物50管/48样¥100.00元 

 

产品详细介绍

 

测定意义:

样品可溶性蛋白质含量常常用于酶活性计算。此外,可溶性蛋白质含量也用于食品等质量分析。

测定原理:

碱性条件下,蛋白质中半胱氨酸、胱氨酸、色氨酸、酪氨酸以及肽键,能将Cu2+还原成Cu+;2分子的BCA与Cu+结合,生成紫色络合物,在540-595nm有吸收峰,562nm处吸收峰大。

 

产品说明书

货号: QS3202           规格:50 管/48 样

 

   BCA 法蛋白含量测定试剂盒说明书 可见分光光度法

 

注意:正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定,

测定意义:

样品可溶性蛋白质含量常常用于酶活性计算。此外,可溶性蛋白质含量也用于食品等质量 分析。

测定原理:

碱性条件下,蛋白质中半胱氨酸、胱氨酸、色氨酸、酪氨酸以及肽键,能将 Cu2+还原成 Cu+; 2 分子的 BCA 与 Cu+结合,生成紫色络合物,在 540-595nm 有吸收峰,562nm 处吸收峰大。

自备实验用品及仪器:

台式离心机、恒温水浴锅、可见分光光度计、移液器、1 mL 玻璃比色皿和蒸馏水。

试剂组成和配制:

试剂 A:液体 50mL×1 瓶,4℃保存。

试剂 B:液体 1mL×1 支,4℃保存。

标准蛋白:液体 2 mL×1 支,4℃保存。

工作液配制:临用前请根据拟用工作液体积(样本数×1 mL),将试剂 A 和 B 按照 50:1 的比例混合,盖紧后充分混匀。

样品中可溶性蛋白质提取:

1. 液体样品:澄清无色液体样品可以直接测定。

2. 组织样品:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g 组织, 加入 1mL 提取液(自备),根据需要选用酶提取缓冲液或者蒸馏水或者生理盐水) 冰浴匀浆,8000g,4℃离心 10min,取上清,即待测液。

3. 细菌、细胞:按照细胞数量(104个):提取液体积(mL)为 500~1000:1 的比例(建议 500 万细胞加入 1mL 提取液),冰浴超声波破碎细胞(功率 300w,超声 3 秒,间隔 7 秒,总时间 3min);然后 8000g,4℃,离心 10min,取上清置于冰上待测。

测定操作:

1. 分光光度计预热 30min,调节波长到 562 nm,蒸馏水调零。

2. 工作液置于 60℃水浴预热 30 min。 

 

 空白管标准管测定管
蒸馏水(μ L)20  
标准品(μ L) 20 
待测液(μ L)  20
工作液(μ L)100010001000
混匀后置于 60℃保温 30min,于 1mL 比色皿在 562nm 处测定吸光值 A,分别记为 A 空白管、A 标准管、A 测定。

注意:空白管和标准管只需要做一次。

计算公式:

Cpr (mg/mL) = C 标准品×(A 测定管-A 空白管)÷(A 标准管-A 空白管) = 0.5×(A 测定管-A 空白管)÷(A 标准管-A 空白管)

Cpr (mg/g)= C 标准品×(A 测定管-A 空白管)÷(A 标准管-A 空白管)÷ W = 0.5×(A 测定管-A 空白管)÷(A 标准管-A 空白管)÷ W

W: 样本质量,g

注意事项:

BCA 法蛋白含量测定试剂盒,适用于测定蛋白浓度在 20-5000μ g/ml 样品。测定前取 1-2 个样 做预实验,若 A 测定管-A 空白管﹥1.5,需将样本用提取液稀释后再测定,以确保测定的准 确性。

 

蛋白含量测定系列   价格
QS3200-50双缩脲法蛋白含量测试盒可见分光光度法50管/48样60
MS3200双缩脲法蛋白含量测试盒微量法100管/96样100
QS3201-50考马斯亮蓝法蛋白含量测试盒可见分光光度法50管/48样60
MS3201考马斯亮蓝法蛋白含量测试盒微量法100管/96样100
QS3202BCA蛋白法含量测试盒可见分光光度法50管/48样100
MS3202BCA蛋白法含量测试盒微量法100管/96样190

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