乳酸含量（Lactic Acid ，LA ）试剂盒 说明 技术文章

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乳酸含量（Lactic Acid ，LA ）试剂盒

商品货号：QS2206
英文名称：LA Assay Kit
别名：乳酸含量试剂盒 LA Kit 乳酸含量（LA）试剂盒 乳酸含量（LA）测试盒
检测方法：常量法

产品详细介绍

测定意义：

乳酸是生物体代谢过程中重要的中间产物，与糖代谢、脂类代谢、蛋白质代谢及细胞内能量代谢密切相关，乳酸含量是评估糖元代谢的和有氧代谢的重要指标。

测定原理：

乳酸在乳酸脱氢酶的作用下生成丙酮酸，同时使NAD+还原生成NADH和H+，H+传递给PMS生成的PMSH2还原INT生成红色物质，在530nm处有特征吸收峰。

产品说明书

货号：QS2206               规格：50 管/24 样

  乳酸含量（lactic acid ，LA ）试剂盒说明书 可见分光光度法

注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。

测定意义：

乳酸是生物体代谢过程中重要的中间产物，与糖代谢、脂类代谢、蛋白质代谢及细胞内能 量代谢密切相关，乳酸含量是评估糖元代谢的和有氧代谢的重要指标。

测定原理：

乳酸在乳酸脱氢酶的作用下生成丙酮酸，同时使 NAD+还原生成 NADH 和 H +，H +传递给 PMS 生成的 PMSH2还原 INT 生成红色物质，在 530nm 处有特征吸收峰。

自备实验用品及仪器：

天平、研钵、离心机、可见分光光度计、1 mL 玻璃比色皿、恒温水浴锅。

试剂组成和配制：

提取液：液体 55mL×1 瓶，4℃保存。

试剂一：液体 8mL×1 瓶，4℃保存。

试剂二：液体 12mL×1 瓶，4℃保存。

试剂三：粉剂×1 支，-20℃避光保存。临用前加入 1.2mL 蒸馏水充分溶解。

试剂四：粉剂×1 瓶，4℃避光保存。临用前加 12mL 蒸馏水充分溶解。

试剂五：粉剂×1 支，4℃避光保存。

标准品：液体×1 支，4℃保存。

显色液：临用前根据用量按照提取液（V）：试剂三（V）：试剂四（V）：试剂五（m）=1： 0.3：3：15（mg）的比例充分混匀。

样本处理：

1. 组织：按照质量（g）：提取液体积(mL)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g，加入 1mL 提 取液）加入提取液，冰浴匀浆后于 4℃，12000g 离心 10min，取上清测定。

2. 细胞：按照细胞数量（104个）：提取液体积（mL）为 500~1000：1 的比例（建议 500 万细 胞加入 1mL 提取液），冰浴超声波破碎细胞（功率 300w，超声 3 秒，间隔 7 秒，总时间 3min）； 于 4℃，12000g 离心 10min，取上清测定。

3. 血清：直接测定。

测定操作：

注意：空白管、标准对照管和标准测定管只需测定一次

计算公式：

1. 按照蛋白含量计算

LA 含量（μ mol/mg prot）=△A 样÷△A 标×C 标÷ Cpr =2×△A 样÷△A 标÷ Cpr

2. 按照样本质量计算

LA 含量（μ mol/g）=△A 样÷△A 标×C 标÷ W =2×△A 样÷△A 标÷ W

3. 按照细胞数量计算

LA 含量（μ mol/104 cell）=△A 样÷△A 标×C 标÷ 细胞数量 =2×△A 样÷△A 标÷ 细胞数量

4. 按照液体体积计算

LA 含量（μ mol/mL）=△A 样÷△A 标×C 标

=2×△A 样÷△A 标

C 标：标准品浓度，2mmol/L ；W：样本质量，g/mL；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL

注意事项：

1. 空白管、标准对照管、标准测定管只需做一次。

2. 若吸光值超过 1.2，请进行适当的稀释后再进行测定，并在计算公式中乘以稀释倍数。

3. 低检出限为 1.8μ mol/L。