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丙酮酸(Pyruvic Acid PA)含量测定试剂盒 说明 技术文章
点击次数:619 发布时间:2019-06-13

当前位置: 首页 > 生理生化试剂盒 > 常量分光光度计法 > 三羧酸循环系列 > 丙酮酸(pyruvic acid PA)含量测定试剂盒

product-view

丙酮酸(Pyruvic Acid PA)含量测定试剂盒

商品货号:QS2204
英文名称:Pyruvate (PA)Assay Kit
别名:丙酮酸试剂盒 PA Kit 丙酮酸(PA)试剂盒 丙酮酸(PA)测试盒
检测方法:常量法

 

商品货号:商品品牌:规格基本售价选择规格
QS2204-50管/48样 50管/48样¥300.00元 

 

产品详细介绍

测定意义:

丙酮酸通过乙酰CoA连接葡萄糖、脂肪酸和氨基酸三大代谢,起着重要的枢纽作用。 

测定原理:

丙酮酸与2,4-二硝基苯肼作用,生成丙酮酸-2,4-二硝基苯腙,在碱性溶液中呈色。

 

产品说明书

货号:QS2204                      规格:50 管/48 样

 

   丙酮酸(pyruvic acid PA)含量测定试剂盒说明书 可见分光光度法

 

正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定

测定意义:

丙酮酸通过乙酰 CoA 连接葡萄糖、脂肪酸和氨基酸三大代谢,起着重要的枢纽作用。

测定原理:

丙酮酸与 2,4-二硝基苯肼作用,生成丙酮酸-2,4-二硝基苯腙,在碱性溶液中呈色。

自备实验用品及仪器:

可见分光光度计、台式离心机、可调式移液器、1 mL 玻璃比色皿、研钵、冰、蒸馏水。

试剂的组成和配制:

提取液:液体 50mL×1 瓶,4℃保存;

试剂一:液体 5mL×1 瓶, 4℃避光保存;

试剂二:液体 25mL×1 瓶, 4℃保存。

丙酮酸提取:

1、细菌或培养细胞:

先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量(104 个):提取液体积(mL)为 500~1000:1 的比例(建议 500 万细菌或细胞加入 1mL 提取液),超 声波破碎(冰浴,功率 20%或 200W,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次),静置 30min, 8000g, 25℃离心 10min,取上清待测。

2、组织:

按照组织质量(g):提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g 组织,加 入 1mL 提取液),进行冰浴匀浆,静置 30min,8000g,25℃离心 10min,取上清待测。 

3、血清(浆)样品:

按照血清(浆)体积(mL):提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议取 0.1mL 血清(浆)加入 1mL 提取液),进行冰浴匀浆,静置 30min, 8000g,25℃离心 10min, 取上清待测。

测定步骤:

1、分光光度计预热 30min 以上,调节波长至 520nm,蒸馏水调零。

2、取 300μ L 样本+100μ L 试剂一于 1.5mL EP 管中,混匀,静置 2min,加入 500μ L 试剂二, 混匀,于 520nm 波长处测定管吸光值 A。

丙酮酸含量计算:

1、标准条件下测定回归方程为 y = 0.0466x + 0.0675; x 为丙酮酸含量(µg/mL),y 为吸光值。

2、按照血清(浆)体积计算

丙酮酸含量(μ g/mL)= [(A-0.0675)÷0.0466×V1]÷(V3×V1÷V2)=214.6×(A-0.0675)

3、按照蛋白浓度计算

丙酮酸含量(μ g/mg prot)=[(A-0.0675)÷0.0466×V1]÷(V1×Cpr)=21.46×(A-0.0675) ÷Cpr

4、按照样品质量计算

丙酮酸含量(µg/g 鲜重)= [(A-0.0675)÷0.0466×V1]÷(W ×V1÷V2)=21.46×(A-0.0675)÷W

3、按照细菌或细胞密度计算

丙酮酸含量( μ g/104 cell ) = [(A-0.0675)÷0.0466×V1]÷ ( 500×V1÷V2 ) =0.043×(A-0.0675)

V1:加入反应体系中样本体积,0.3mL;V2:加入提取液体积,1 mL;V3:加入血清(浆)体 积,0.1 mL; Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样本质量,g;500:细菌或细胞总数,500 万。

注意:低检测限为 1μ g/mL 或 1μ g/g 鲜重或 10ng/mg prot

 

三羧酸循环系列   单价 
QS2100α酮戊二酸脱氢酶(α-KGDH)测试盒紫外分光光度法50管/48样720
MS2100α酮戊二酸脱氢酶(α-KGDH)测试盒微量法 100管/96样1400
QS2101柠檬酸(CA)含量测试盒可见分光光度法50管/48样350
MS2101柠檬酸(CA)含量测试盒微量法 100管/96样690
QS2102琥珀酸脱氢酶(SDH)测试盒可见分光光度法50管/48样260
MS2102琥珀酸脱氢酶(SDH)测试盒微量法 100管/96样500
QS2103丙酮酸脱氢酶(PDH)测试盒可见分光光度法50管/48样720
MS2103丙酮酸脱氢酶(PDH)测试盒微量法 100管/96样1400
QS2104线粒体异柠檬酸脱氢酶(ICDHm)测试盒 紫外分光光度法50管/48样530
MS2104线粒体异柠檬酸脱氢酶(ICDHm)测试盒 微量法 100管/96样1000
QS2106-50乙酰辅酶A测试盒紫外分光光度法50管/48样3200
QS2106-25乙酰辅酶A测试盒紫外分光光度法25管/24样2000
MS2106乙酰辅酶A测试盒微量法 100管/96样5800
QS2107-50线粒体柠檬酸(MCA)含量测试盒紫外分光光度法50管/48样2500
QS2107-25线粒体柠檬酸(MCA)含量测试盒紫外分光光度法25管/24样1500
MS2107线粒体柠檬酸(MCA)含量测试盒微量法 100管/96样4700
QS2206乳酸含量(LA)测试盒可见分光光度法50管/24样650
MS2206乳酸含量(LA)测试盒微量法 100管/48样1280
QS2204丙酮酸(PA)含量测试盒可见分光光度法50管/48样300
MS2204丙酮酸(PA)含量测试盒微量法 100管/96样580
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