Product classification
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| 英文名称 | Mycoplasma Detection Kit |
| 储存条件 | 2-8℃，避光 |
| 有效期 | 1年 |
| 规格 | 100T 200T |
| 单位 | 盒 |
本试剂盒是利用荧光染料（bisbenzimide,Hoechst 33258）检测支原体污染。这种染料会结合到DNA的A-T富集区域，因为支原体的DNA中A-T含量高（55％～80％），所以可将其染色而被检测到。被支原体污染的细胞经染色后在细胞周围可看到许多大小均一的荧光小点，即为支原体的DNA染色斑，说明有支原体污染。Hoechst 33258的最大激发波长为346nm，最大发射波长为460nm；Hoechst 33258和双链DNA结合后，最大激发波长为352nm，最大发射波长为461nm。
操作步骤：
贴壁细胞：
1.被检细胞接种于无菌的6孔细胞培养板中，接种密度为1-2×104。同时，接种正常无支原体感染的同种细胞，作为阴性对照。
2.5天后，先吸去培养液，再加入1ml的固定液，静置20min，
3.吸去固定液，晾干。
4.于每孔中，加入1ml的Hoechst33258工作液（Hoechst 33258工作液须覆盖全部被检细胞），37℃避光放置15-20min或室温静置20～30min。
5.吸去Hoechst 33258工作液，加入2ml灭菌超纯水洗涤三次，直接风干。风干后加入一滴封片液，并以盖玻片覆盖。
6.荧光显微镜观察。用紫外激发光激发，观察细胞周围是否有蓝色荧光小点或串珠状荧光小点。
悬浮细胞：
1.收集需检测的细胞，1500rpm，5min。
2.将收集的细胞涂片于载玻片上，再加1ml的固定液，静置20min。
3.吸去固定液，晾干。
4.于每孔中，加入1ml的Hoechst33258工作液（Hoechst 33258工作液须覆盖全部被检细胞），37℃避光放置15～20min或室温静置20～30min。
5.吸去Hoechst 33258工作液，用无菌水洗涤玻片3次，直接风干。风干后加入一滴封固液，并以盖玻片覆盖。
6.荧光显微镜观察。用紫外激发光激发，观察细胞周围是否有蓝色荧光小点或串珠状荧光小点。
结果判断（参考）：
阴性：仅见细胞的细胞核呈现黄绿色荧光。
阳性：除细胞外，细胞周围可见大量的大小均一的荧光着色颗粒。
注意事项：
1.Hoechst工作液对人体有害，请注意防护。
2.固定液有刺激性气味，建议在通风橱进行固定。
3.支原体检测时，最好用不含抗生素的培养液培养2～3代，这样容易避免假阴性结果。
4.本试剂盒用于6孔板检测时，可以进行50次检测反应。
5.检测支原体污染，可以使用支原体高效Vero细胞，这样可以提高检测灵敏度，即将被检测样品接种于Vero细胞进行检测。
公司简介
上海索莱宝生物科技有限公司是一家集销售生化试剂、实验耗材、自产分子生物学产品为一体，并能提供的专业性生物科技公司。公司秉承“以客户为中心，以产品为保障、以诚信为基础、以创新为宗旨"的发展理念，在依靠客户的大力支持和员工的不懈努力下获得了快速的成长。公司织结构清晰，内部管理科学，拥有一支既分工细致又高度合作的年轻化队伍，保持了各个部门之间的高效合作运转，充分保障了公司在充满竞争的市场中处于地位。公司注重与*合作，目前已与 Amersham、Amresco、Axygen、BD、Corning、Dragon、Eppendorf等企业结成紧密的合作伙伴关系，代理其世界的*产品，并在全国各地设有分销机构。我们将以高度的责任感和出色的产品质量为客户提供高品质的产品和实验技术解决方案。丰富的经验、优良的品质、充足的库存、准确的交货时间、竞争力的价格，所有这些都保证了我们向您提供的是专业的服务！立足北京，上海，*，随着产品营销战略的不断延伸，我们将逐步发展成为*的专业性生物科技公司。我们希望能够和尊敬的客户一起，利用各自的资源优势和勇于进取的敬业精神，为中国生命科学研究的发展作出更多的贡献。为了更好、更全面的发展，现公司正在诚招各地代商和招聘若干销售、研发人员，欢迎垂询并期待您的加入！
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